干旱胁迫下烟草的指标分析

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1、材料：烟草幼苗正常对照：3盆实验组：3盆*31•植物体内游离脯氨酸含量的测定一、目的在逆境条件下（旱、热、冷、冻），植物体内脯氨酸的含量显著增加，植物体内脯氨酸含量在一定程度上反映了植物的抗逆性，抗旱性强的品种积累的脯氨酸多。因此测定脯氨酸含量可以作为抗旱育种的生理指标。另外，由于脯氨酸亲水性极强，能稳定原生质胶体及组织内的代谢过程，因而能降低冰点，有防止细胞脱水的作用。在低温条件下，植物组织中脯氨酸增加，可提高植物的抗寒性，因此，亦可作为抗寒育种的生理指标。二、原理磺基水杨酸对脯氨酸有特定反应，当用磺基水杨酸提収植物样品时，脯氨酸便游离于磺基

2、水杨酸溶液中。然后用酸性苗三酮加热处理后，苗三酮与脯氨酸反应，生成稳定的红色化合物，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯屮，色素的深浅即表示肺氨酸含暈的高低。在520nm波长下测定吸光度，即可从标准曲线上查出脯氨酸的含量。三.材料、仪器及试剂1.材料：植物叶片。2.仪器：分光光度计；电子分析天平；离心机；小烧杯；普通试管；移液管；注射器;恒温水浴锅；漏斗；漏斗架；滤纸；剪刀；洗耳球。3•试剂及配制:2.5%酸性苗三酮溶液配制：将1.25g前三酮溶于30ml冰醋酸和20ml6mol-L_,磷酸中,搅拌加热（70°C）溶解，贮于冰箱中。3%磺基水杨酸

3、配配制：3g磺基水杨酸加蒸饰水溶解后定容至lOOmlo10Ug・ml，脯氨酸标准母液配制：精确称取20mg脯氨酸，倒入小烧杯内，用少量蒸馆水溶解，再倒入200ml容量瓶中，加蒸镭水定容至刻度（为100Pg・m「脯氨酸母液），再吸取该溶液10ml,加蒸僧水稀释定容至100ml,即为lOug-mr1脯氨酸标准液。冰醋酸；甲苯。四、实验步骤1.脯氨酸标准曲线的制作1・1取6支试管，编号，按下表配制每管含量为0〜12ug的脯氨酸标准液。加入表中试剂后，置于沸水浴屮加热30mino取出冷却，各试管再加入4ml甲苯，振荡30秒钟，静置片刻，使色素全部转至甲

4、苯溶液。试剂管号01234510ug•ml'1脯氨酸标准液（ml）00.20.40.60.81.0蒸饰水（ml）21.81.61.41.21.0冰醋酸（ml）2222222.5%酸性苗三酮（ml）222222每管脯氨酸含量（ug）0246810材料：烟草幼苗正常对照：3盆实验组：3盆*31•植物体内游离脯氨酸含量的测定一、目的在逆境条件下（旱、热、冷、冻），植物体内脯氨酸的含量显著增加，植物体内脯氨酸含量在一定程度上反映了植物的抗逆性，抗旱性强的品种积累的脯氨酸多。因此测定脯氨酸含量可以作为抗旱育种的生理指标。另外，由于脯氨酸亲水性极强，能稳定

5、原生质胶体及组织内的代谢过程，因而能降低冰点，有防止细胞脱水的作用。在低温条件下，植物组织中脯氨酸增加，可提高植物的抗寒性，因此，亦可作为抗寒育种的生理指标。二、原理磺基水杨酸对脯氨酸有特定反应，当用磺基水杨酸提収植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸溶液中。然后用酸性苗三酮加热处理后，苗三酮与脯氨酸反应，生成稳定的红色化合物，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯屮，色素的深浅即表示肺氨酸含暈的高低。在520nm波长下测定吸光度，即可从标准曲线上查出脯氨酸的含量。三.材料、仪器及试剂1.材料：植物叶片。2.仪器：分光光度计；电子分析天平；离心机；小

6、烧杯；普通试管；移液管；注射器;恒温水浴锅；漏斗；漏斗架；滤纸；剪刀；洗耳球。3•试剂及配制:2.5%酸性苗三酮溶液配制：将1.25g前三酮溶于30ml冰醋酸和20ml6mol-L_,磷酸中,搅拌加热（70°C）溶解，贮于冰箱中。3%磺基水杨酸配配制：3g磺基水杨酸加蒸饰水溶解后定容至lOOmlo10Ug・ml，脯氨酸标准母液配制：精确称取20mg脯氨酸，倒入小烧杯内，用少量蒸馆水溶解，再倒入200ml容量瓶中，加蒸镭水定容至刻度（为100Pg・m「脯氨酸母液），再吸取该溶液10ml,加蒸僧水稀释定容至100ml,即为lOug-mr1脯氨酸标准

7、液。冰醋酸；甲苯。四、实验步骤1.脯氨酸标准曲线的制作1・1取6支试管，编号，按下表配制每管含量为0〜12ug的脯氨酸标准液。加入表中试剂后，置于沸水浴屮加热30mino取出冷却，各试管再加入4ml甲苯，振荡30秒钟，静置片刻，使色素全部转至甲苯溶液。试剂管号01234510ug•ml'1脯氨酸标准液（ml）00.20.40.60.81.0蒸饰水（ml）21.81.61.41.21.0冰醋酸（ml）2222222.5%酸性苗三酮（ml）222222每管脯氨酸含量（ug）02468101・2用注射器轻轻吸取各管上层脯氨酸甲苯溶液至比色杯中，以甲苯

8、溶液为空白对照，在520mm波长处测定吸光度（A）值。1.3标准曲线的绘制以1〜5号管脯氨酸含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。1.样品的测