紫外可见吸收光谱法实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划紫外可见吸收光谱法实验报告　　实验一：紫外-可见吸收光谱　　一、实验目的　　1.熟悉和掌握紫外-可见吸收光谱的使用方法2.用紫外-可见吸收光谱测定某一位置样品浓度3.定性判断和分析溶液中所含物质种类二、实验原理　　紫外吸收光谱的波长范围在200~400，可见光吸收光谱的波长在400~800，两者都属于电子能谱，两者都可以用朗伯比尔定律来描述　　A=εbc　　其中A为吸光度;ε为光被吸收的比例系数；c为吸光物质的浓度,单位mol/L；b为吸收层厚度，单位cm有机化合物的紫外

2、-可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃迁的结果，其中包括有形成单键的σ电子、有形成双键的π电子、有未成键的孤对n电子。外层电子吸收紫外或者可见辐射后，就从基态向激发态跃迁。主要有四种跃迁，所需能量ΔE大小顺序为σ→σ*>n→σ*>π→π>n→π*　　1、开机　　打开紫外-可见分光光度计开关→开电脑→软件→联接→M进行调节实验需要的参数：波长范围700-365nm扫描速度高速；采样间隔：2、甲基紫的测定校准基线目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正

3、常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　将空白样品放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准标准曲线的测定分别将5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml、20ug/ml甲基紫溶液移入比色皿，放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存测定试样　　将试样甲基紫溶液移入比色皿，放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存3、甲基红的测定校准基线　　将空白样品放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准测定试样　　将试样甲基紫溶液移入比色皿，放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存四、实验结果　　1.未知浓度的测定　　分别测定了5μg/ml，10μg/ml

4、，15μg/ml，20μg/ml和未知浓度的甲基紫溶液的紫外吸收光谱，紫外吸收谱图如下：　　甲基紫在580nm是达到最大吸收见下表：　　各浓度在580nm的吸光度　　数据做成散点，结果显示，能很好的拟合直线如下图：　　由计算机计算的拟合直线的关系为A=-　　故带入未知浓度的甲基紫溶液的吸光度得浓度为μg/ml-1　　2.化合物的定性分析　　已知甲基橙和甲基紫的结构式如下图所示：目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员

5、的业务技能及个人素质的培训计划　　甲基橙　　甲基红　　从图中可知，甲基紫约在580nm左右达到吸光度的最大值，而甲基橙溶液在410那么时达到吸光度最大值，这是由于甲基紫和甲基橙的结构不同造成的，由于甲基紫结构高度共轭，形成大π键，故最强吸收峰要的波长要比甲基橙的大，同时由于高度共轭，吸光强度也有所增强。　　一、实验目的　　1、学会使用UV-2550型紫外-可见光分光光度计。　　2、掌握紫外—可见分光光度计的定量分析方法。　　3、学会利用紫外可见光谱技术进行有机化合物特征和定量分析　　的方法。　　二、实验原理　　基于物质对200-800nm光谱区辐射的吸收特性建立起来的分析测定方法称

6、为紫外—可见吸收光谱法或紫外—可见分光光度法。紫外—可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生，同时伴随着分子的振动能级和转动能级的跃迁，因此吸收光谱具有带宽。紫外—可见吸收光谱的定量分析采用朗伯-比尔定律，被测物质的紫外吸收的峰强与其浓度成正比，即：目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　其中A是吸光度，I、I0分别为透过样品后光的强度和测试光的强度，ε为摩尔吸光系数，b为样品厚度，

7、c为浓度。　　紫外吸收光谱是由于分子中的电子跃迁产生的。按分子轨道理论，在有机化合物分子中这种吸收光谱取决于分子中成键电子的种类、电子分布情况，根据其性质不同可分为3种电子：形成单键的σ电子；　　形成不饱和键的π电子；氧、氮、硫、卤素等杂原子上的未成键的n电子。　　图1.基团中的σ，π，n成键电子　　当它们吸收一定能量ΔE后，将跃迁到较高的能级，占据反键轨道。分子内部结构与这种特定的跃迁是有着密切关系的，使得分子轨道分为成键σ轨道、反键σ*轨道、成键π轨道、反键π*轨