无菌操作技术实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划无菌操作技术实验报告　　实验四植物材料的准备与无菌操作技术　　一、实验目的　　1.通过实验掌握选择合适的外植体，并进行科学的体表灭菌，获得无菌植物材料的方法。2.通过在超净工作台上进行无菌操作训练，掌握植物组织培养的无菌操作技术。　　二、实验药品与用具　　超净工作台、75%酒精、次氯酸钠、MS培养基、接种器械、酒精灯、植物材料、小型喷雾器。　　三、实验方法　　外植体消毒　　1、外植体处理后在自来

2、水流水下冲洗。　　2、放到75%酒精中浸泡30s，倒掉后用无菌水冲洗。　　3、用2%次氯酸钠处理10min后，无菌水清洗数次，备用。　　无菌操作技术　　1．操作人员进入接种室前必须用水和肥皂洗净双手，换上已消毒的工作服、帽子、口罩、鞋子后方可进入接种室。　　2．接种前用70-75%酒精喷雾或擦洗工作台台面，开紫外灯照射20~30min；，在送风15~30min，让过滤空气吹拂工作台面和台壁四周。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个

3、行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　3．用75%酒精消毒双手，并用酒精将装有培养基的培养瓶进行消毒后放进工作台上。　　4．接种工具用95%酒精浸泡后在酒精灯上灼烧灭菌。，　　5．接种时，腰带口罩，不准讲话或对着实验材料或培养容器呼吸。打开瓶塞或瓶盖时注意不要污染瓶口。瓶口在拔塞前灼烧灭菌。手不能接触接种器械的前半部分，接种操作时，培养瓶、试管或三角瓶应水平放置或倾斜一定角度，避免直立放置而增大污染机会。手和手臂应

4、避免在培养基、植物材料、接种器械上方经过。在接种过程中，接种器械要重新灼烧灭菌。　　6．切割外植体时，应在预先经灭菌的接种盘或培养皿、牛皮纸上进行。　　7．在每次操作之前尽量把操作过程中必须使用器械盒药品先放入台内，不要中　　途拿进。同时，台面上放置的东西也不宜太多，特别注意不要把东西迎面堆得太高，以致挡住气流。　　四、实验作业　　1.将本次的实验内容整理成实验报告。　　2.接种一周后，观察接种材料的污染情况，说明污染的类型并分析污染的原因。　　南京林业大学实验报告　　专业学号姓名目的-通过该培训员工可对

5、保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　实验二、灭菌、无菌操作技术　　一．实验目的：　　1、了解并掌握植物材料的准备、消毒。　　2、培养基配制及器皿高温灭菌。　　3、无菌操作及接种的原理和技术。　　二、实验原理　　植物组织培养必须在无菌环境中进行，因此外植体、器皿及作为外植体生长介质的培养基的灭菌操作非常重要，一旦污染，就会造成组

6、织培养的失败。野外植物材料都有各种菌类，进行离体培养前需经过表面消毒灭菌；培养基封装封口后应立即灭菌，至少应在24小时内完成(转载于:写论文网:无菌操作技术实验报告)灭菌程序。　　三、材料与仪器　　1、材料：喜树带芽茎段　　2、仪器设备：高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。　　四、实验步骤　　1）培养基的消毒将分装好的培养基放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右，灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷

7、却凝固。　　2）高压蒸汽灭菌锅的使用方法目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　高压锅放水至平把架；把包扎好的培养基装入高压锅；盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀；然后接通电源；压力计升至时，打开放气阀,排除冷空气(此步很重要)；排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到位置时，开始计算灭

8、菌时间，具体方法：当压力锅指针升至时，关闭电源，待指针下降至时接通电源，不断重复此操作过程，维持20分钟；灭菌时间达到20分钟后，除去电源，打开放气阀(注意要逐渐放气)待高压锅内的空气完全排除后，打开热压灭菌锅盖(注意对角扭松螺帽)稍待冷后再把培养基取出；经过灭菌的营养培养基不宜放置太长，应尽早使用，但为了在使用前能检查培养基有无微生物污染，可将培养基置于25℃下保存4天，如果培养基需要贮存较长时间，可在4℃低温下保存。　　3