细胞生物学作业汇总

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时间:2018-12-09

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1、1•导致G蛋白激活的反应和导致Ras激活的反应之间有哪些异同?共同点是:两种激活过程都依赖于某些蛋白质,可催化G蛋白或Ras蛋白上的GDP/GTP交换。不同点是:G蛋白偶联受体可直接对G蛋白行使这种功能,而那些酶联受体被磷酸化激活后则先将多个衔接蛋口装配为一个信号复合物,再对Ras进行激活。2・G蛋白偶联受体与酶偶联受体的主要不同点是什么?G蛋白偶联受体都是7次跨膜的蛋白质,在信号转导中全部与G蛋白偶联。配体与受体结合后激活相邻的G蛋白,被激活的G蛋白又可激活或抑制一•种产生特异第二信使的酶或离子通道。(腺昔酸环化酚或PLCP

2、)酣联受体都属于单次跨膜受体,既是受体又是酶,一旦被配体激活即具有酶活性并信号放大。3•血小板来源的生长因子(PDGF)可激活Elk-1转录因子。这个过程涉及哪些分子?PDGF结合信号分子,形成二聚体,并发生口磷酸化,活化的RTK激活RAS,RAS引起蛋白激酶的磷酸化级联反应,最终激活冇丝分裂原活化蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinase,MAPK),活化的MAPK进入细胞核,可使许多底物蛋口的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化,Elk-1激活。4•比较cAMP信号通路系统与IP3-DAG信号通路系统在跨膜信

3、号传递作用上的异冋点。相同点是:cAMP途径与IP3-DAG途径都是G蛋白偶连信号通路。不同点是:cAMP信号通路系统中,信号分子与受体结合后,通过与GTP结合的调节(G蛋白)的耦联,在细胞内产生第二信使,从而引起细胞的应答反应。而IP3-DAG信号通路系统,信号分子与受体结合,使质膜上的4,5—二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)水解成1,4,5—三磷酸肌醇(IP3)和二酰昔油(DG)两个第二信使,分别启动两个信号传递途径即IP3-Ca2+(1P3是一种水溶性分子,在细胞内动员内源Ca2+,使胞质中内源Ca2+浓度提高。Ca茁通过钙

4、调蛋口引起细胞反应)和DG—PKC途径(DG激活蛋白激酶C(PKC)),实现细胞对外界的应答。5•简述单克隆抗体的原理及制备过程:单克隆抗体的原理:把用预定抗原免疫的小鼠脾细胞与能在体外培养屮无限制生长的骨髓瘤细胞融合,形成B细胞杂交瘤。这样制成的融合细胞,既能像骨髓瘤细胞一样在体外培养中能无限地快速增殖且永生不死,又能像脾淋巴细胞那样合成和分泌特弄性抗体。这种细胞克隆示产生的单克隆抗体具有纯度高、特异性强、产蜃大等优点。单克隆抗体制备的主要步骤:①匸常小鼠免疫处理;②用物理、化学和生物方法促使细胞融合;③杂交瘤细胞的筛选•培

5、养;④单克隆抗体的提纯。目前利用杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本方法主要包括以下主要步骤:①将某种抗原注射到小鼠体内进行免疫,然后取出脾细胞(B细胞)与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合;②利川特殊的选择性培养基,选择出杂交瘤细胞,再逐一克隆,从屮挑选岀能产生抗体的杂交瘤细胞;③将杂交瘤细胞接种到培养瓶小扩大培养或注射到动物体内使Z成为腹水瘤,然后从小分离纯化单克隆抗体。7•简述真核细胞的基本结构体系。1.以脂质及蛋口质成分为基础的工物膜结构系统:功能是,保证物质交换与跨膜运输、信息与能虽传递,化学反应进行;绝大部分生化反应在膜表面进行;

6、膜使细胞内部结构区室化;为细胞内的物质运输提供了特殊的运输通道,保证了各种功能蛋白及时准确地到位而又互不干扰。2.以DNA或RNA与蛋口质为主要成分的遗传信息表达系统:遗传信息表达体系乂称为颗粒纤维结构体系,包括细胞核和核糊体。细胞核屮染色质是纤维结构,由DNA和组蛋H构成。核仁的主要功能是「RNA的转录和核糖体亚单位的组装,分为丝状区和颗粒区。核仁DNA主要是rDNA,是转录rRNA的模板。染色体的一级结构是有核小体组成的串珠结构,其肓径为10nm,又称为10nm纤维。核糖体是由rRNA和蛋白质构成的颗粒结构,肓径为15〜2

7、5nm,由人小两个亚基组成,它是细胞内合成蛋口质的场所。1.由特界蛋白分子装配构成的细胞骨架系统:由一系列特异的结构蛋白搭建的骨架网络结构。包括胞质骨架和核骨架。胞质骨架的主要成分是微管(主要成分微管蛋白,微管结合蛋口,主要功能:对细胞结构起支架作用,形成纺锤丝,对人分子与颗粒结构起运输作川)、微丝(主要成分肌动蛋白,主要功能信号传递与细胞运动)和中间丝(与细胞成分的表达,细胞分化冇关)。广义的核骨架包括核纤层(主要成分核纤层蛋白)与核基质。8•简述细胞周期同步化的方法及优缺点的比较方法一:有丝分裂选择法:M期细胞打培养皿的附

8、着性低,振荡脱离器壁收集。优点:操作简单,同步化程度高,细胞不受约物伤害。缺点:获得的细胞数量较少(分裂细胞约山1%〜2%)o方法二:细胞沉降分离法:M期细胞体积大,可用离心分离。优点:可用于任何悬浮培养的细胞。缺点:同步化程度较低,非普遍适用。方法三:DNA合成阻断法:选用

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