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时间:2018-12-06
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1、毕业论文题目:乙肝表面抗原的ELISA法定量分析方法学验证姓名:学号:系别:年级:专业:医学检验 指导教师:二○一一年十二月...目录中文文献英文摘要前言。1.材料与方法。1.1试剂盒1.2仪器1.3方法1.3.2.铺板方案1.3.3.加样步骤2.结果2.1标准曲线与线性范围2.2准确度(回收率)的验证22.3精密度的验证2.3.1板内精密度的验证2.3.2板间精密度的验证2.4检测限(LOD)计算53.讨论53.1乙肝表面抗原定量分析的意义53.2常用定量分析方法63.3方法概述63.4方法学验证内容63.5结果分析及应用评价7参考文献7...乙肝表面抗原的ELI
2、SA法定量分析方法学验证摘要目的:对福州蓝图生物工程有限公司生产的HBsAg的ELISA法定量分析试剂盒进行方法学验证,以判断是否能用于临床样本分析。方法:ELISA法定量分析,应用试剂盒HBsAg标准品从浓度为8ng/ml做2倍稀释的6个浓度梯度做标准曲线,以6,3,1.5ng/ml3个浓度梯度5复孔做准确度,精密度和检测限等方法学验证。结果:标准曲线R2=0.997,准确度97.07%,1.5ng/ml的RSD为16.78%,不满足ng/ml级水平的RSD一般应<15%的要求,检测限LOD为0.172ng/ml,低浓度样品(<1.5ng/ml)的检测在准确性和精
3、密度方面都低于高浓度样品,不适合低浓度样品的检测。结论:该HBsAg的ELISA法定量分析试剂盒不能用于临床标本的分析。关键词乙肝表面抗原ELISA定量分析方法学验证ThereificationoftheHBsAgELISAquantitativemethodologyAbstractObject:toverifythequantitativemethodologyofFuzhoublueprintbiologicalengineeringcompanytomakesurewhetheritcabeusedtotheanalysisofClinicalSample.
4、Methods:ELISAquantitativemethodology,makeanApplicationofthestandardHBsAgkitfromtheconcentrationof8ng/mldo2timesdilutedsixconcentrationgradienttoconstituteastandardcurve,testingWith6,3,1.5ng/ml3aconcentrationgradient5accuratelypreciseanddetection.Results:standardcurve,R2=0.997,theaccura
5、cyofRSDof1.5ng/mis16.78%,theRSDthatcannotmeetthedemandofng/mlbasiclevelislessthan<15%incommon.TheLODis0.172ng/ml,thetestingofLowconcentrationsamples(<1.5ng/ml)arelowerthanhighconcentrationsamplesinbothaccuracyandprecision,whichasaresultmakeitunsuitableforlowconcentrationsampletesting.C
6、onclusion:theELISAquantitativeanalysiskitofHBsAgcannotbeusedfortheanalysisofClinicalSample.KeywordsHBsAgQuantitativeanalysisVerificationMethodology....前言乙肝病毒感染是我国最常见的感染性疾病之一,而乙型肝炎血清标志物是检测乙肝病毒感染最主要的病原标志。随着免疫学技术的不断发展,抗原抗体检测灵敏度明显提高,使低水平乙肝病毒得以检出,对临床诊断及流行病学有重要意义[1]。ELISA法具有较高灵敏度、特异性强、重复性好、可
7、进行定量和半定量测定等优点,可以在酶免疫分析仪上做批量检测。目前临床上多倾向于做定量分析,若想知道检验结果是否可靠,实验室则必须对所用试剂盒进行方法学验证,本实验对福州蓝图生物工程有限公司生产的HBsAg的ELISA法定量分析试剂盒进行准确度,精密度和检测限等方法学验证,现报告如下。1.材料与方法1.1试剂盒乙肝表面抗原ELISA法定量分析试剂盒,福州蓝图生物工程有限公司出品。1.2仪器酶标仪:Bio-Rad680;洗板机:Bio-Rad1575;超纯水系统:MilliporeElix;电热恒温培养箱(DNP-9052)上海精宏实验设备有限公司;振荡器(苏州管械
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