人胃癌组织中fibulin5的表达及其临床意义

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1、人胃癌组织中fibulin5的表达及其临床意义作者：文灿董世武余汇洋　【摘要】目的探讨fibulin5在人胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色结合图像分析法，对32例胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织中fibulin5的表达进行半定量分析。结果fibulin5在胃癌组织中的表达强于癌旁组织和正常组织(P<0.05)，且表达强度与癌组织的分化程度有关，低分化癌组织的fibulin5表达强(P<0.05)。结论fibulin5的表达可能与胃癌组织细胞的恶性转化及增殖有关。【关键词】fibulin

2、5胃癌免疫组织化学【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionandclinicalsignificanceoffibulin5ingastriccarcinoma.MethodsTheexpressionoffibulin5inhumangastriccanceroustissues,precanceroustissuesandnormalgastrictissueof32casesiquantitativelyexaminedbyimmunohistochemicalstai

3、nbinedageanalysis.ResultsTheexpressionoffibulin5inhumangastriccanceroustissuesalgastrictissues(P<0.05),ayinvolveproliferationandmalignanttransformationofthegastriccancerouscells.【Keymunohistochemistryfibulin5是细胞外基质蛋白家族fibulin家族中的最新成员，亦称为FBLN5、DANCE或EVEC。fibulin

4、5为一含448个氨基酸的糖蛋白，含有6个与钙离子结合的表皮生长因子样(EGFlike)区域，其中一个区域含有能与整合素结合的RGD基序。后者能在细胞表面与整合素αvβ3、αvβ5结合［1］。fibulin5的表达与肿瘤的发生、发展关系密切［2-3］。但人胃癌组织中fibulin5的表达情况经笔者检索尚未见报道。我们采取免疫组织化学染色结合图像分析的方法，对胃癌组织中fibulin5的表达进行半定量分析研究，以了解胃癌组织中fibulin5的表达情况，并对其临床意义进行初步探讨。1材料与方法1.1材料胃癌手术切除标本32例

5、，其中男22例，女10例；年龄25～74岁(平均56岁)，均经病理学确诊。按《中国常见恶性肿瘤诊治规范》(胃癌分册)标准进行病理分类：分化较好组：高分化腺癌2例，乳头状腺癌2例，中分化管状腺癌4例；分化较差组：低分化腺癌20例，印戒细胞癌2例，未分化癌2例。取材部位包括胃癌、癌旁及远离癌灶的正常组织，经4%多聚甲醛(PFA)固定后浸于30%蔗糖(用4%PFA配制)溶液，4℃冰箱保存。羊抗人fibulin5IgG单克隆抗体购自SantaCruz公司；兔抗羊IgG抗体及抗体稀释液和DAB显色试剂盒等皆购自北京中杉金桥生物技术有限公司

6、。1.2方法常规冷冻切片，片厚10μm，直接贴于载玻片。免疫组织化学染色按常规方法进行，fibulin5抗体工作浓度为1∶200，用抗体稀释液代替fibulin5抗体作阴性对照。以组织细胞中出现棕色或棕褐色颗粒为阳性。每个标本随机取5张切片，在20倍物镜下，每张切片选阳性表达最高的5个视野照相(Olypus)，采用IPP图像分析软件，取5个视野的积分光密度(IOD)的平均值表示该切片的表达强度计量值。1.3统计学分析计量数据以±s表示，采用SPSS10.0软件包统计学分析，以α=0.05作为检验水准。文灿，等.人胃癌组织中fi

7、bulin5的表达及其临床意义2结果阳性染色位于细胞质内，呈棕褐色，在正常胃组织中，染色浅，阳性细胞较为均一(图1A)。在分化较好胃癌组织中，阳性着色深浅不均，阳性细胞显著增多，多呈弥散分布，也有的密集成团，腺管及少数的炎性细胞也有染色(图1B)。而在低分化组织中，阳性细胞进一步增多，染色深，多密集成团，癌灶边缘及增生活跃区域最为密集，癌巢及癌细胞密集区阳性细胞较少(图1C)。在对照实验中没有阳性染色细胞(图1D)。共有27例检出阳性染色细胞，其中高分化组7例，低分化组20例，经χ2检验，阳性率差异无统计学意义(P>0.0

8、5，表1)。经图像分析结合单因素方差分析，胃癌组织fibulin5表达明显高于癌旁组织及正常的胃组织(P<0.05，表2)，但癌旁组织与正常胃组织的fibulin5表达差异无统计学意义(P>0.05)。经t检验，fibulin5的