利用穴盘育苗筛选抗根肿病大白菜材料的实用技术

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1、利用穴盘育苗筛选抗根肿病大白菜材料的实用技术导读：大白菜根肿病在全国乃至世界范围内的发生日趋严重，严重影响着大白菜的品质和产量。通过不断试验，探讨出一套利用穴盘育苗筛选大白菜抗根肿病材料的实用技术，以期为大白菜根肿病抗性品种的快速、有效选育提供依据。中国2/vie　　目前国内对十字花科根肿病的研究集中在其致病机理及病害防控上，对选育抗病品种这一最为经济有效的防病方法的技术研究却不多。利用基质和穴盘育苗筛选抗根肿病材料对关键环节的技术要求较高，通过2013-2015年3年的试验积累，探讨出一套利用穴盘育苗筛选大白菜抗根肿病材料的实用技术，再结合田间抗性鉴定、单株留种，希望为大白菜根肿病抗性品种

2、的快速、有效选育做出贡献。　　1新鲜根肿组织中休眠孢子的分离提纯　　接种用休眠孢子最好从新鲜根肿组织中提取，可保证孢子的致病力。为避免其他杂菌、杂物对试验结果的影响，需对休眠孢子进行分离、提纯。根肿组织流水冲洗干净后晾干，-20℃冰箱中冷冻备用。将10g根肿组织切碎，加50mL灭菌水，在研钵中研细或用榨汁机打碎，然后用4层脱脂纱布过滤，将滤液移入一干净的50mL离心管，3100r/min离心15min，弃上清液，沉淀重溶于50mL灭菌水，　　3100r/min离心10min，此步操作重复2次。弃上清液，在沉淀中加5mL50%蔗糖溶液，混匀后，3100r/min离心10min，用移液枪把上清液

3、小心移入1支干净的离心管，加30mL灭菌水，3100r/min离心10min，弃上清液，沉淀重溶于30mL灭菌水，3100r/min离心10min，此步操作重复2次，最后沉淀溶于5mL灭菌水，-20℃冰箱中冷冻备用。　　2育苗接种专用试验棚的准备　　有条件的地区，可利用单独的日光温室或于发病地头建塑料大拱棚，专做抗根肿病材料苗期接种、筛选试验用，同时注意防止休眠孢子的扩散。或做长×宽×高为150cm×30cm×120cm的可移动铝合金棚架，两宽面置外拉门，四面均用60目防虫网罩起。棚架上部设单脊双面屋顶，用塑料膜覆盖防雨。竹条苗床裁成合适大小置于棚底。将网棚置于易于隔离、通风见光良好的地块，

4、内挂2块黄板，处于网棚中上部位置。网棚周围铺0.5m石灰条带防止孢子扩散。当外界温度高于25℃时，棚顶要覆遮光率50%的遮阳网遮光。　　3带菌基质配制及材料播种　　3.1带菌基质配制　　大白菜一般用50穴穴盘育苗，旧穴盘要用50%百菌清可湿性粉剂1000倍液喷洒消毒、冲洗晾干后方可使用。秋季育苗基质配方为草炭∶蛭石∶珍珠岩=3∶1∶1，春季育苗基质配方为草炭∶蛭石∶珍珠岩=6∶1∶3。装盘时，将菌液稀释后均匀拌入基质，按根肿组织∶基质=1∶20的质量比掺匀。　　3.2播种　　华北地区一般春季在2月底3月初，秋季在8月下旬，将试验材料播种于穴盘中，每穴1～2粒，要保证种子的纯度和净度在99%以

5、上。蛭石和珍珠岩（体积比1∶1）覆盖后，�⒚缗桃频接�苗接种专用试验棚苗床上，浇透水，春季覆膜保墒秋季不用。保证棚内夜温16～23℃、昼温20～26℃，温度过低时加盖保温材料，过高时通风及覆遮阳网遮荫。　　4播种后管理及伤根处理　　4.1播种后苗盘管理　　播种后5天左右大白菜即可出苗，要及时揭膜，防止烤苗。子叶展平前及时间苗、移补苗。出苗后视基质含水量，一般每2～3天微喷1次清水，浇水量不宜过大，防止稀释基质中孢子浓度，保持基质湿度60%～70%即可。幼苗第3片真叶展开时，结合浇水，每3～5天喷施1次瑞莱20-10-20通用型肥料1000倍液。气温高时，浇水次数增加至每天1次，但注意控制喷水

6、量，保持基质湿度70%～80%即可。如网棚中不慎进入害虫，可用1.8%阿维菌素乳油2000～3000倍液防治菜青虫、夜蛾等，用10%吡虫啉可湿性粉剂3000倍液防治蚜虫。　　4.2伤根处理　　为提高接种的成功率，出苗后15～20天，在早晨或傍晚进行1次伤根处理。操作时，距白菜幼苗根茎部0.5～1.0cm，用小刀垂直于穴孔基质表面插下至穴孔底部，注意不要伤及幼苗主根、割破穴盘，一刀即可。伤根后及时浇水。　　5统计调查　　一般出苗后45天左右，感病对照品种全部发病时开始统计调查。由于穴盘育苗的大白菜根系紧紧缠绕基质，不易将根系完全洗出，为保持抗病材料根系的完整性以便定植，采用直接观察根坨法统计：

7、0级，主根、侧根无肿块；1级，侧根有明显肿块，主根无肿块；2级，主根有明显肿块，侧根无肿块；3级，主、侧根均有少量明显肿块；4级，主、侧根均有大量严重肿块。材料抗病性评估标准：高抗，0<病情指数<10；抗病，10≤病情指数<20；耐病，20≤病情指数<30；感病，30≤病情指数≤100。病情指数=　　[∑（各级发病株数×各病级代表数值）/（调查总数×最高病级代表数值）]×100。调查后的根肿组织可洗净晾干后，