两种ames试验方法在蒲葵子提取物致突变试验中灵敏度的研究

《两种ames试验方法在蒲葵子提取物致突变试验中灵敏度的研究 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、两种Ames试验方法在蒲葵子提取物致突变试验中灵敏度的研究【摘要】目的通过Ames试验与彷徨试验对蒲葵子正丁醇提取物的致突变试验结果，比较两种试验的灵敏度。方法对蒲葵子用正丁醇浸提，用Ames试验方法（掺入法）与彷徨试验方法，对TA100鼠伤寒沙门氏菌株进行致突变试验。结果两种试验方法结果显示，蒲葵子正丁醇提取物在5～500μg/ml剂量范围，以Ames试验方法与彷徨试验均检测出阳性结果，而在0.025μg/ml与0.5μg/ml剂量下，彷徨试验能检测出阳性结果，而Ames方法未检测出阳性结果。结论在较低浓度时，彷徨试验能检测出Ames试验检测不出的阳

2、性结果，表明彷徨试验灵敏度较Ames试验高。【关键词】正丁醇提取物；Ames；彷徨试验；灵敏度　　Abstract：ObjectiveToparethesensitivityoftheFluctuationtestandAmestestforexaminationofthesuddenchangecausedbyChinesefan-palmsub-normalbutylalcoholextraction.MethodsChinesefan-palmalbutylalcohol,andAmestestandFluctuationtestousesalm

3、onellatyphimurium.ResultsTheresultsdemonstratedthattheextractintherangeof5～500μg/ml，theAmestestmethodandthefluctuationtestmethoddetectedthepositiveresult,andintherangeof0.025～0.5μg/ml,theFluctuationtestcouldexaminepositiveresult,buttheAmestestcouldnotchange.ConclusionInloineposi

4、tiveresultbutAmestestcannot,estest.　　Keyalbutylalcoholextraction;Ames;Fluctuationtest;Sensitivity　　鼠伤寒沙门氏菌／哺乳动物微粒体酶试验（Ames试验），是利用一组组氨酸营养缺陷型菌株加入待测物在有或没有微粒体活化系统条件下，发生回复突变的特征鉴定化学物质的诱变活性，现已成为初步筛选化学物潜在致突变的首选方法。彷徨试验也是一种细菌回复突变试验，根据营养缺陷型菌株与受试化学物温育后在缺乏相应营养物的培养液中的生长情况判断所试化学物的诱变活性，节省试验材料(辅

5、酶Ⅰ其需Ames平板掺入法用量的20%)。实验结果表明，Ames试验结果与动物致突变性有90%的相符率，而彷徨试验对于弱的、具有细胞毒性和低浓度的诱变／致突变物的检测有其优超性。因此这些方法是较好的化学物质诱变活性评价的试验方法。　　1材料　　1.1受试药物　　蒲葵子正丁醇提取物：蒲葵子分别用95%乙醇回流提取，浓缩成浸膏后，用正丁醇反复浸提，得到提取物的浓缩部分(以下简称蒲葵子提取物)。　　1.2实验菌株鼠伤寒沙门氏菌变异株组氨酸缺陷型TA100(由美国SIGMA公司提供)，经鉴定为合格菌株，置于平板备用。　　1.3阳性对照物①2-氨基芴，美国SIG

6、MA公司；②叠氮钠，美国SIGMA公司。　　1.4Ames试验培养液按文献方法〔1〕配制，彷徨试验培养液按美国SIGMA公司提供方法配制，体外活化系统(S9混合液)按标准方法经多氯联苯诱导大鼠肝微粒体酶制备而成〔2〕。　　2方法　　2.1Ames试验用标准平板掺入法〔1〕，在经灭菌的45℃左右含顶层琼脂2ml的试管中，依次加入受试物、菌液各0.1ml，S9混合液0.5ml，充分混匀后倒在底层培养基平板上铺平，37℃培养48h，每次试验同时设阴性，阳性对照，每个浓度设两个平行平皿，每个受试物至少重复1次，计数平均每毫升回空菌落数。　　2.2彷徨试验（改进

7、的Ames试验）〔3〕取含组氨酸(2μg／m1)的培养液5ml加过夜培养菌液0.1m1，S9混合液0.1ml和待测物0.1ml，摇匀分装于50支小试管中，同时做阴性对照，37℃培养20h，各管加入古溴甲酚紫(5μg／m1)的培养液2ml，继续培养3d，计数变色管数。　　3结果　　3.1Ames试验凡致突变率(MR=受试物平均回变菌落数／阴性对照回变菌落数)大于或等于2，有剂量反应关系并有重复性的受试物为诱变阳性〔4〕，结果见表1。由表1可见蒲葵子提取物对TA100(+S9／-S9)在5～500μg/ml剂量范围内表现出诱变阳性。进一步分析见表2，可以看

8、出随着两种化合物浓度的增加，致突变率均相应增高，经统计学处理，证明浓度与致突变率间呈直线相关，