肾癌患者外周血中survivin mrna的表达

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1、肾癌患者外周血中survivinmRNA的表达作者：侯子珍，王志平，岳中瑾，卢建中，付生军，马宝良【关键词】肾癌；RTPCR；survivinmRNA　肿瘤的浸润与转移是恶性肿瘤的重要特征，也是恶性肿瘤患者死亡的重要因素。肾细胞癌是成人肾脏最常见的恶性肿瘤。近1/3的肾细胞癌患者在诊断原发肿瘤时已有转移灶，另外约40%的患者术后一年内出现复发、转移。肾细胞癌一旦转移，5年生存率<10%，平均存活时间不到2年。未接受治疗者的3年存活率<5%。因此寻找敏感、特异的检测方法和肿瘤转移指标以明确肿瘤有无转

2、移对临床诊断、治疗及预后判断具有重要的临床意义。近年来，RTPCR法以其很高的灵敏性，被广泛用于各种实体瘤微转移(micrometastasis)的检测[12]。本研究应用RTPCR检测了肾细胞癌患者外周血中survivinmRNA的表达,初步探讨其在肾细胞癌微转移中的意义。1资料与方法1.1临床资料收集兰州大学第二医院泌尿外科2004年12月-2005年8月经病理证实的肾透明细胞癌患者外周血标本共30例。男19例，女11例，年龄48-76岁，平均57岁。病理分级按arker、琼脂糖均购自北京天为时代科技

3、有限公司。RTPCR试剂盒为Takara公司产品。survivinmRNA引物参考检测肿瘤微转移的方法很多，如细胞形态学、流式细胞仪、细胞遗传学、免疫细胞化学、免疫组织化学等,但效果并不理想[56]。直至20世纪80年代后期,高灵敏度PCR方法的出现使得检测循环肿瘤细胞及微小残余病灶的存在再次成为可能。而RTPCR技术是在PCR基础上发展起来的基因诊断方法，可快速扩增特异基因和DNA片段,可检测出106-107个正常细胞中的一个肿瘤细胞，是一种非常敏感的检测方法[7]。随着分子生物学技术的飞速发展，运用R

4、TPCR检测患者外周血中某些特异性基因的表达已成为判断有无异位肿瘤细胞存在的一种重要手段[8]。肿瘤标志物包括传统的大分子标志物(主要是大分子蛋白质)和基因标志物，大分子蛋白质以抗体为基础进行IHS或蛋白质印迹(期特异性表达。基于survivin基因在正常组织中不表达，而在肿瘤发生的早期往往能够检测的这一特性，因此可用于肿瘤发生的早期诊断。多方面研究提示survivin可能是一种癌基因，参与肿瘤的发生发展，是一个具有潜在价值的肿瘤标志物。虽然survivin对于肾癌不具有组织特异性，但有着肿瘤特异性，因此检测

5、肾癌患者外周血中survivinmRNA的表达，可以明确肿瘤有无转移，对手术选择术式及清扫范围，确定术前、术后治疗方案，减少肿瘤的转移和复发将起到重要作用，从而为临床的诊断、治疗带来根本变化。本研究采用RTPCR方法检测了30例肾细胞癌患者外周血中survivinmRNA的表达，其阳性率为76.7%，与正常健康人0%相比其差异具有统计学意义。survivinmRNA的表达随肿瘤组织分化程度的降低,阳性率有增加的趋势,但各组间比较差异无统计学意义，可能与病例数少及组间分配不平衡有关。但随着临床病理分期的提高,外

6、周血中survivinmRNA的阳性率有显著上升趋势，各组间比较差异有统计学意义。同时我们注意到有明确转移病灶存在(包括血道转移)的晚期患者(RobsonⅢ、Ⅳ期)外周血中survivinmRNA的阳性率为100%，明显高于早期肾癌患者(RobsonⅠ、Ⅱ期)56.3%，说明该方法是可靠的。因此我们认为RTPCR方法可以作为肿瘤微转移检测的敏感手段[7]，survivin可以作为肿瘤标记物用于肿瘤微转移的检测。微转移是出现转移灶的早期阶段。微转移的转归取决于癌细胞的生物学特性、机体的免疫状态及与宿主器官微环境

7、之间的相互作用。血液中即使检测到循环肿瘤细胞，但并不一定可致显著的临床转移灶的发生。Glaves等对10例肾细胞癌的观察发现，每例术前释入肾静脉的癌细胞数高达109，而只有3例最终形成转移。尽管如此，血液中循环肿瘤细胞或微转移灶的存在毕竟增加了恶性肿瘤转移的风险。Azuhata[10]研究表明，survivin的阳性表达是肾肿瘤复发的高危因素且提示预后不良。检测外周血中survivinmRNA可作为肿瘤微转移的一个监测指标，将有助于肿瘤的早期诊断和预后的评估，确定患者术后复发的危险性，指导选择正确的治疗方案。【

8、参考