非小细胞肺癌中survivin蛋白的表达及其与 p53表达的关系论文

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1、非小细胞肺癌中survivin蛋白的表达及其与p53表达的关系论文王静，杨继要，石敏，吴逸明，吴拥军【摘要】目的探讨非小细胞肺癌组织中survivin蛋白的表达与临床病理特征的关系及其与p53表达的相关性。方法采用免疫组化的链霉菌抗生物素过氧化酶法（StreptavidinPeroxidase,SP）检测80例NSCLC组织和20例正常肺组织中survivin、p53蛋白表达情况。结果80例非小细胞肺癌组织中survivin蛋白阳性例数49例，表达率为61.3%，在肺良性病变组织中，未阳性表达.freeling,Email:zzu.edu.Abstrac

2、t：ObjectiveTostudytheexpressionofsurvivinanditsrelationshipallcelllungcarcinoma).MethodsTheexpressionofsurvivin,p53proteinallungtissuebyimmunohistochemicalStreptavidinPeroxidase(SP)method.Resultssurvivinaandin0of20(0)casesofnormallungtissuesasignificantlyhigherthanthatinnormallung

3、tissues(P0.05).ThepositiverateofsurvivininstageⅢ～Ⅳphnodemetastasis(P0.05),ThereisthepositivecorrelationexistingintheexpressionofSurvivin,mutationP53inlungcarcinoma.Conclusionsurvivinayplayanimportantroleinlungcarcinogenesisandbeidentifiedasadefinitediagnosticmarkerandapotentialthe

4、rapeutictargetinNSCLC.CooperativehighexpressionofsurvivinandmutationP53inlungcancertissuesmaymakelungcancerdevelopquickly.Key的切片，60℃烘烤，脱蜡，3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，微波修复抗原，10%非免疫血清封闭，加入1∶50稀释的兔抗人survivin多克隆抗体（美国Neomarkers公司）和鼠抗人p53单克隆抗体（美国Zymed公司）4℃过夜孵育，PBS冲洗，滴加1∶300生物素标记二抗，室温下30min，冲洗，滴加1∶

5、40稀释的SP溶液，室温下30min,冲洗后DAB（武汉博士德生物工程公司）显色,苏木素—伊红（HE）复染，封片。对照染色:免疫组化染色设阳性对照，以乳腺癌阳性标本作为阳性对照；阴性对照，以PBS液代替一抗作为阴性对照。1．3免疫组化结果判定及计数方法survivin蛋白阳性反应为淡黄至棕黄色颗粒，定位于胞浆；p53阳性反应为棕黄色颗粒，定位于细胞核。survivin蛋白阳性细胞的计数：按照Sinicrop2的标准作组织化学记分：H=N×I。若H1为阳性，若H≤1则为阴性。阳性细胞数记分（N）5个高倍视野阳性细胞数的百分率。共分5个等级：5.0%；5.0%～

6、25.0%；26.0%～50.0%；51.0%～75.0%；75.0%。着色强度记分（I）:1分弱阳性(+)；2分中度阳性（++）；3分强阳性(+++)。p53染色阳性细胞的计数方法：每例标本随机选取10个高倍镜视野，计数1000个细胞，计算阳性细胞百分率。阳性细胞百分率≥25%为阳性，25%为阴性。阳性细胞不再进一步分级。1．4统计学分析应用SPSS10.0统计分析软件，采用χ2检验，Spearman等级相关性分析，以P0.05作为差异显著性的判定标准。2结果2.1survivin蛋白在肺癌和肺良性病变组织中的表达survivin蛋白的阳性反应

7、为淡黄色颗粒，表达较强时呈棕黄色，主要定位于胞浆。肺癌组织的survivin蛋白阳性表达率为61.3%(49/80)，但在肺良性病变组织中，未见阳性染色，两组比较差异有显著性（χ2=24.020,P0.05）。2.2survivin蛋白表达与肺癌病理特征的关系在III～IV期肺癌组织中survivin蛋白阳性表达率72.0%显著高于I～II期肺癌组织43.3%(P0.05)；在无淋巴结转移（N0）组和有淋巴结转移（N1、N2）组中的阳性表达率分别与肺癌组织学分型、分化程度无关（P0.05）,.freeltP53)与survivin蛋白的表达呈正相关。推测在

8、非小细胞肺癌发生的过程中p53基因突变可能打破了ot