丙型肝炎病毒细胞及动物模型的设计研究进展

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1、WORD格式可编辑丙型肝炎病毒细胞和动物模型的研究进展摘要：丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus,HCV）是造成慢性肝炎、肝硬化及肝癌的重要原因之一，目前全世界约有1.7亿人感染HCV。由于缺少有效的HCV细胞培养系统和小动物模型，人们对其生活周期、作用机制等仍不是很清楚，从而严重阻碍了HCV疫苗及治疗药物的开发与研制。本文就近几年在HCV细胞和动物模型方面的进展作一综述。关键词：丙型肝炎病毒　细胞模型　动物模型ProgressinEstablishmentofHCVCellandAnimalModelAbstract:Hepatitis

2、Cvirus(HCV)isamajorcauseofchronicliverdisease,suchaschronichepatitis,hepaticcirrhosis,hepatocelhlarcarcinoma,withover170millionpersistentlyinfectedindividualsworldwide.Lackofproperstudymodelshasbroughtdifficultiesinthestudyofthemechanismofviralinfection,lifecycleandpathogenic

3、mechanismofHCVandalsobecomethemajorobstaclesinthedevelopmentofefficientvaccineandnewdrugsforhepatitisC.HeretheadvancesonestablishmentofHCVinfectiouscellandanimalmodelswerereviewed.KeyWords:HepatitisCvirus(HCV);cellmodel;animalmodel丙型肝炎是全球关注的公共卫生难题，目前全球约有1.7亿人感染HCV，我国进行的全国HCV血

4、清流行病学调查显示，我国一般人群抗-HCV阳性率约为3.2%，全国共约4000万人感染HCV，HCV是造成慢性肝炎、肝硬化及肝癌的重要原因之一。约50％-80％的HCV感染者会转变为慢性感染患者，而大约20％的患者会在20年内转变为肝硬化。一旦转为肝硬化，每年将会有1％－5％的病人发展成为肝癌，严重地威胁着人类的健康。长期以来，缺少合适的研究模型一直是HCV研究的瓶颈，近年来HCV体外培养系统的建立使其相关研究提供了强有力的工具，为从根本上认识HCV奠定了基础。本文概述了近年来HCV研究模型的开发进展。1HCV的基本分子生物学特征HCV属黄病毒科

5、丙型肝炎病毒属，为单股正链RNA病毒，基因组全长9.6kb，含有一个开放的编码区，可编码一个多聚蛋白前体，此多聚蛋白前体由宿主和病毒的信号肽酶剪接成3个结构蛋El（Core、E1、E2）和7个非结构蛋白（NS1、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B）。HCVC蛋白由191个氨基酸残基组成，是HCV基因组中较为保守的结构区域。5′UTR区最为保守，而3′UTR对于HCVRNA的正常复制是不可缺少的（图1）[1]。专业技术资料整理分享WORD格式可编辑图1　HCV基因组结构1HCV的细胞模型1.1感染模型感染是建立HCV细胞模型最简

6、单直接的方法，是用HCV阳性血清直接和HCV敏感细胞共同培养使细胞感染。早在1992年，Shimizu等[2]报道用鼠逆转录病毒感染人T淋巴细胞系MOLT-4Ma和HPB-Ma，再用可连续感染大猩猩的病毒株和上述细胞共培养，24d后仍可在细胞内检测到病毒RNA的存在。随后用人淋巴细胞白血病病毒HTLV-I预处理MT-2细胞系后再用HCV感染也得到类似的结果。研究人员分别在HPB-Ma、PBMC、Huh-7、Hep-G2和其他SV-40T抗原永生化肝脏细胞系上也建立了HCV持续感染系统，同时观察到此感染效率与病毒体内滴度密切相关，并可被相应抗体中和

7、和干扰素抑制．持续复制的病毒直径约为50nm，采用RT-PCR方法可间隙性检测出。Iacovacci等[3]则选用人胎肝细胞作为培养HCV的靶细胞，用竞争性PCR定量检测病毒RNA分子，发现培养后30d达到HCV复制水平的最高值。他们还发现血清中病毒颗粒的蔗糖梯度密度为1.18~1.36g/cm3，而细胞和上清中检测到的病毒颗粒密度有高低两种（高：1.18~1.36g/cm3；低：1.05~1.105g/cm3）。Rumin等[4]用HCV阳性血清和人肝细胞共同培养，观察4个月，发现这些感染细胞在10d后可检测到正链RNA，而培养上清中的RNA滴

8、度在3个月中也有了升高。而YoshikuraH等[5]用HCV患者血清感染细胞时，也发现了病毒颗粒密度有高低两部分，密度高的部分感染性低