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时间:2018-11-18
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1、NBD多肽治疗实验性溃疡性结肠炎的实验研究作者:杨剑,崔淑兰,龙友明,陈垦,王晖,王念林,谢文瑞,刘君君【摘要】 目的观察核因子κB必需分子(NFκBessentialmodulator,NEMO)结合的小分子多肽(micromoleculepolypeptidebiningain,NBD多肽)对实验性大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。方法60只SD大鼠随机分成治疗组、对照组各30只,采用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法制作溃疡性结肠炎大鼠模型,治疗组予腹腔注射1.3mg/100g体质量的NBD多肽,对照组予等量生理盐水,评估炎症活动指数(IAI),给药后7d处死相应组的动物取结肠,肉眼观察结肠
2、黏膜病变且按损伤情况积分,行病理切片、苏木素伊红(hematoxylineosin,HE)染色,光镜下评估组织损伤;取病变结肠组织切片行免疫组化检测核因子κB(NFκB)表达,检测髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)。结果治疗组大体形态损伤、组织学损伤评分、IAI评分分别为2.41±0.43、4.80±0.82、6.02±0.59,明显低于对照组(3.50±0.51、6.90±1.13、3.05±0.51)(P<0.05);治疗组MDA、MPO及NFκB表达均低于对照组(P<0.05)。结论NBD多肽对于溃疡性结肠炎大鼠模型有较好的治疗作用,其作用与其抑制NFκB表达有
3、关。【关键词】NBD多肽溃疡性结肠炎动物模型NFκB免疫组化 Abstract:ObjectiveToobservetheTimeactivitycurveofthetherapeuticeffectofmicromoleculepolypeptidebiningainonexperimentalulcerativecolitisrat.MethodssixtySDratslydividedintotreatedandcontrolgroup.Ulcerativecolitisratmodelicromoleculepolypeptidebiningaininisteredbyintr
4、aperitonealintreatedgroup,andejustdosesliquornatriichloridiisotonicusinisteredlikelyincontrolgroup.IAIscoreodeladefortheobservationofthecolonicpathologicchangesbynakedeyeandfortheestimationofthedamagescoresofcolonmucosa.Finally,thecolontissueakepathologicalsectionandthedamagescoreoftissueicroscope
5、.AndthendamagedcolontissuespathologicalsectiontestexpressionofNFκBbyimmunizinghistochemistry.ThenthevalueofMDA、MPOinsupernatantofsamplessdamagedcolontissuesdivideevenlyanoardamagescores、damagescoresoftissue、IAIscoreare2.41±0.43、4.8±0.82、6.2±0.59,andtheyallareloicromoleculepolypeptidebiningainha
6、sprotectiveeffectagainstratulcerativecolitis,anditsmechanismrelatodulatorbindingdomain(NBD)peptide;ulcerativecolitis;animalmodel;NFκB;immunohistochemistry 溃疡性结肠炎(UC)即慢性非特异性溃疡性结肠炎,是一种病因尚未完全明确的直肠和结肠的慢性炎症性疾病,病程迁延,有癌变趋势,近年来患病率呈上升趋势。目前研究发现核转录因子κB(nuclearfactorκB,NFκB)参与了炎症性肠病(inflammatoryboa公司生产。
7、1.1.3试剂三硝基苯磺酸(TNBS):美国Sigma公司生产,批号:P2297;髓过氧化物酶(MPO)测试盒及丙二醛(MDA)测试盒,南京建成生物工程研究所,批号均为040722;考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒,南京建成生物工程研究所提供,批号20060814。兔抗NFκB多克隆抗体,武汉博士德生物工程有限公司提供。SP试剂盒和二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)试剂盒均购自上海西唐生物工
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