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1、藏药短穗兔耳草有效部位的抑菌活性研究论文杨云裳，张应鹏，马兴铭，李春雷，苏策，师彦平【关键词】短穗兔耳草;,,,抑菌活性;,,,提取物摘要：目的对短穗兔耳草LagotisbrachystachyMaxim挥发油及全草分萃取段进行了抑菌活性研究。方法选择金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为代表菌种,筛选出了对所选细菌的生长具有明显抑制作用的抗菌活性部分。结果短穗兔耳草挥发油、石油醚萃取部分、醋酸乙酯萃取部分、正丁醇萃取部分都具有部分活性。结论短穗兔耳草挥发油对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抑菌活性，石油醚萃取部分对5种细菌都不敏
2、感，醋酸乙酯萃取部分对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠埃希菌有抑菌活性.freelAbstract：ObjectiveTostudyantibacterialactivityofLagotisbrachystachyMaxim.MethodsTheantibacterialactivitiesonStaphylococcusaureus,Bacillussubtilis,Salmonellatyphimurium,Escherichiacoli,Pseudomonasaeruginosaofallthefractionsobtainedethersolubl
3、efractionoftheplantethylacetatesolublefractionsoftheplant,.freels,ethersolublefractionoftheplantisthemostinactive;ethylacetatesolublefractionsoftheplantissignificanttoStaphylococcusaureus,Bacillussubtilis,Escherichiacoli;nbutylalcoholsolublefractionsoftheplantissignificanttoStaphylo
4、coccusaureus,Bacillussubtilis,Salmonellatyphimurium,Pseudomonasaeruginosa.Key；Antimicrobialeffect;Extraction短穗兔耳草LagotisbrachystachyMaxim为玄参科兔耳草属植物的全草，藏名直打萨曾，产于海拔2300~4100m的河滩草地、沟边、树林空地。分布于我国青海、甘肃、西藏等省区。为常用藏药的上品。味苦，性平。止血排脓。治肺胃淤血、子宫出血、肺结核、胸腔脓血、培根与赤巴合并症、血热性化脓症、黄水症等［1~3］。短穗兔耳草显微特征在《藏药志
5、》中有一定描述，该资源在产区也较为丰富，为藏医常用。有关该植物的抗菌活性尚未见文献报道，我们对短穗兔儿草的全草分溶剂萃取段进行了抗菌活性研究，筛选出具有明显抗菌活性的部位，为该药的进一步研究及综合开发利用提供一定的理论依据。1材料与方法1.1材料短穗兔耳草购自青海湟中藏医医院，并经中国科学院西北高原生物研究所黄荣福研究员鉴定。试剂与菌株MH琼脂、MH肉汤、平板菌落计数琼脂:杭州微生物试剂厂;细菌菌株:金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)CMCC(B)ATCC25923、大肠埃希菌(Escherichiacoli)CMCC(B)ATCC25
6、922:枯草芽孢杆菌（O901）、铜绿假单胞菌（ATCC27853）、伤寒沙门氏菌（ATCC6539），兰州大学基础医学院免疫学教研室提供。所用试剂均为分析纯。1.2方法1.2.1短穗兔儿草的预处理取干燥短穗兔耳草4.0kg粉碎，用95%工业乙醇浸泡提取3次，7d/次。回收乙醇，提取浸膏(260g)溶于热水中，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取。分别减压回收溶剂，依次得到总浸膏、石油醚、醋酸乙酯、正丁醇部分和水溶性部分。挥发油部分制备方法如下：取石油醚萃取部分5g，加入150ml乙醚溶解，再加入300ml蒸馏水进行水蒸汽蒸馏，收集溜出液；用乙醚萃取6次，无水硫
7、酸钠干燥，减压蒸馏回收乙醚，得到浅黄色油状液体，密封保存，待用。1.2.2短穗兔儿草有效部位抗菌活性分析［3,4］菌液制备：取实验菌株接种于MH琼脂平板培养基中，35℃培养14h，用MH液体培养基制备菌悬液，菌液浓度1.5×108CFU（colonyformingunit，CFU）ml-1备用。含药物纸片制备：将药物溶解后，灭菌备用。每张纸片（直径6mm）加药物样品10μl，阴性对照是助溶剂，空白对照生理盐水；阳性对照是庆大霉素溶液。K－B法：取菌液浓度为1.5×108CFUml-1的菌株0.2ml，均匀涂布整块MH琼脂培养基表面，室温2～5min后，贴加含药
8、纸片，置入35℃恒温培养箱培养16～1
