硫酸镍致大鼠睾丸细胞线粒体及微粒体损伤

《硫酸镍致大鼠睾丸细胞线粒体及微粒体损伤》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、硫酸镍致大鼠睾丸细胞线粒体及微粒体损伤【关键词】硫酸镍；睾丸；线粒体；微粒体；氧化应激　　摘要：目的从氧化应激角度探讨硫酸镍(NiSO4)对大鼠睾丸细胞线粒体及微粒体的毒性作用。方法健康性成熟ethodsThirtytaleeckman公司)。722型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)。SHAB型水浴恒温振荡器(常州国华仪器厂)。　　13方法　　131剂量选择与分组健康g/kg组。连续腹腔注射染毒30d，1次/d，自由摄食饮水。　　132样品制备(1)组织匀浆的制备：染毒结束次日，颈椎脱位法处死大鼠，迅速摘取双侧睾丸，称重后取双侧睾丸，去包膜，

2、放入表面皿中剪碎，加入匀浆介质(001mol/LTris-HCl缓冲液，pH74)，用玻璃匀浆器制成10%(in离心10min，弃沉淀，上清液再重复离心1次，弃沉淀，留取上清液用低温高速冷冻离心机12000r/min离心15min，沉淀物即为线粒体。(3)微粒体的制备：取分离线粒体后的上清液，用高速冷冻离心机40000r/min离心30min，沉淀物即为微粒体。将分离提取的线粒体和微粒体分别用冰冷的匀浆介质制备成混悬液，超声破膜后待用。　　133指标检测每个样品检测2个平行样，严格按照试剂盒说明书测定睾丸细胞线粒体和微粒体中LPO、TAOC、ROS

3、的水平。　　14统计分析采用SPSS100软件进行单因素方差分析，并进行两两比较。　　2结果　　21染毒动物的一般状况和睾丸脏器系数的变化(表1)染毒早期动物出现轻微的兴奋表现，染毒中期有精神萎靡，行动迟缓，毛发蓬松，拖尾等现象，染毒后期个别动物出现腹泻症状，至染毒结束时未发现动物死亡情况。睾丸大体形态观察发现，硫酸镍25mg/kg组大鼠睾丸组织出现充血、水肿等现象，脏器系数略大于其他各组(P＞005)。50mg/kg组睾丸脏器系数降低，与NS组比较，差异无统计学意义(P＞005)。　　表1NiSO4对大鼠睾丸细胞线粒体中LPO、TAOC、ROS的

4、影响（略）　　注：与对照组比较，aP＜005，bP＜001；n=8　　由表1可见，与对照组比较，染毒组大鼠睾丸细胞线粒体中T-AOC降低(P＜001)，LPO和ROS含量升高(P＜005)。　　22NiSO4对大鼠睾丸细胞微粒体中LPO、T-AOC、ROS的影响(表2)　　表2NiSO4对大鼠睾丸细胞微粒体中LPO、T-AOC、ROS的影响（略）　　注：与对照组比较,aP＜005，bP＜001;n=8由表2可见，染毒组大鼠睾丸细胞微粒体中T-AOC降低(P<0.01)，LPO和ROS含量升高(P<0.05)。　　3讨论　　本实验结果表明

5、，硫酸镍腹腔注射染毒后，大鼠睾丸细胞线粒体的氧化应激效应增强，提示此时线粒体产生过量ROS，引发链式脂质过氧化生成大量的LPO，同时抑制T-AOC活性，引起线粒体内膜跨膜电位的下降，导致线粒体膜通透性发生变化，甚至出现线粒体DNA的广泛损伤〔9〕，进一步引起睾丸生殖细胞的损伤。本文结果显示，镍可导致微粒体氧化应激效应增强，引起微粒体膜的损伤及其氧化酶类活性的变化，造成睾丸细胞的损伤。研究发现〔１０〕，镍可导致大鼠睾丸组织匀浆中ROS、LPO和T-AOC水平的改变。Kodipura等报道〔１１〕，镍可导致小鼠睾丸组织细胞匀浆、线粒体和微粒体中LPO含

6、量升高，抑制谷胱苷肽过氧化物酶和S-转移酶活性，使乳酸脱氢酶活性升高，与本次实验结果一致。因此，本实验结果提示，线粒体和微粒体氧化应激水平的增强可能是镍致睾丸细胞损伤的机制之一。　　参考