植物组织培养实验中相关的问题答案

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1、1.为什么顶端分生组织没有病毒，生长的好？病毒在寄生植物体内随维管束系统转移，在茎尖分生组织中没有维管束系统，病毒运动困难，其移动速度落后于茎尖生长速度，导致顶端分生组织附近病毒浓度低，甚至不带病毒。、①在植物体内，病毒是通过维管朿系统移动的，分生组织不存在维管朿系统。②病毒在细胞间移动的另一个途径是通过胞间连丝移动，速度较慢，难以赶上茎尖分裂旺盛的分生细胞。③分裂旺盛的分生细胞代谢活性强，使病毒无法a制。2.超净工作台的工作原理？将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经过高效空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流从一定的均匀的断面风

2、速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层齊合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超浄空气层流，即所谓“高效的特殊空气”，它除去了大于0.3urn的尘埃、真菌和细菌孢子等等。超净空气的流速为24〜30m/min，这已足够防止附近空气可能袭扰而引起的污染，这样的流速也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。3.植物组织培养中培养液中的碳源为什么蔗糖最好，为何不用单糖？螯合铁有何好处？植物在光合作用后合成的碳水化合物一般以蔗糖和淀粉形式储存，蔗糖可以储存也方便转运，且植物利用蔗糖

3、的系统很完善，因此培养基用蔗糖。培养基中添加蔗糖而不是葡萄糖，是以大量实验为基础的。大量实验表明，蔗糖能支持绝大多数植物离体培养物的旺盛生长，因此被作为植物组织培养的标准碳源而广泛应用，大多数合成培养基也均以蔗糖作为唯一的碳源。其屮的原因可能有下列儿个方而：①同样作为碳源和能源物质，蔗糖较葡萄糖能更好地维持培养基A的低渗环境。配制相同质呈分数的培养基，蔗糖形成的渗透压要明S低于葡萄糖，若采用葡萄糖作为碳源，易使植物细胞脱水而生长不良。同吋，植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率，所以蔗糖形成的滲透压可较长时间地保持相对稳定。②植物组

4、织培养过程中，要特别注意防止培养基受到微生物的污染。微生物生长所耑的碳源最适合的是葡萄糖，而较少利用蔗糖，因此采用蔗糖作为培养基的碳源，可在一定程度上减少微生物的污染。③从能源供应来说，相同物质的量浓度下，蔗糖比葡萄糖提供的能量多。使用螯合铁的0的：避免沉淀；缓慢不断地供应铁。4.培养基为什么不能太软？培养基太软，材料在培养基中不稳定，甚至下沉，从而影响组织的呼吸。培养基的硬度可能受到所用琼脂的质量、培养基pH及无机盐浓度的影响，灭菌时间过长也回导致培养太软。5.至少5种灭菌剂的灭菌原理？1.氯化汞氯化汞也称升汞，是一种剧毒的重金属盐杀菌剂，

5、其杀菌的原理是Hg2+可与带负电荷的蛋白质结合，使细菌蛋白变性，酶失活。氯化汞使用浓度为0.1%〜0.2%,浸泡8〜15分钟，就可以有效地杀死附着在外植体表而的细菌及真菌芽孢，灭菌效果极好。但用鉍化汞灭过飽的外植体材料要用无幽水反多次洗涤（一般不少于5次），才可将残留的药剂除净。使用氯化汞会给环境造成污染，一般情况下，应尽量用其它消毒剂灭菌，而以少用或不用氯化汞为宜。2.次氯酸钠市售次氯酸钠又称为“安替福民”，活性氧含量是0.8%，使用时稀释3〜5倍，浸泡外植体5〜30分钟后，再用无菌水洗涤4〜5次。它分解出具有汆菌作用的氯气，灭飽后易于除去

6、，不留残余，杀菌力强，对植物材料无害，是植物组织培养常用的杀菌剂之3.漂白粉漂白粉为白色的粉末，一般含10%〜20%（质量/体积）的次氯酸钙rCa（ClO2）l，使用时用饱和溶液，杀菌的原理在于它分解出具有杀菌作用的氯气。氯与蛋白质屮的氨结合，使歯体蛋白质氧化，代谢功能发生障碍。注意漂白粉腐蚀金属、棉织品，刺激皮肤，易吸潮散失有效氯而失效，平吋要密封储藏，最好现配现用，不要储藏太久。1.酒精酒精（乙醇）具有较强的穿透力和杀菌力，它使细菌蛋白质变性。使用的浓度一般为70%〜75%。处理时间15〜30秒，不宜太长，因为细胞容易收缩脱水。它具有浸润

7、和灭菌的双重作用，使用于表而消毒，但不能达到彻底的灭菌，必须结合其它药剂灭菌。为了提高乙醇的杀菌效果，可在乙醇溶液屮加入0.1%的酸或碱，以改变细胞表面带电荷的性质而增加膜透性，提高乙醇的灭菌效果。2.高锰酸钾高锰酸钾的火菌原理在于它能使细菌酶蛋白中的巯基氧化成二硫基而失去酶活性。浓度稀时起氧化作用杀死细菌，日常生活中通常用作皮肤、果蔬的表面消毒剂，在一盆清水屮加入儿粒高锰酸钾就可起到杀菌的作用。3.植物组织培养中脱除病毒的方法及其优缺点。热处理是利用病毒和寄主祖物对高温的忍耐性的差异，使植物的生长速度超过病毒的扩散速度，得到一小部分不含病毒

8、的植物分生组织，进行无毒个体培育。常用的方法是将病毒感染的植物用35°C〜38'C热空气处理2〜4周或者更长时间进行脱毒。此法尤其适合处理生理干旱的材料和处于休眠状