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时间:2018-11-13
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1、一解合方对更年期抑郁症大鼠中枢单胺类神经递质及生【摘要】目的:研究一解合方对更年期抑郁症模型大鼠单胺类神经递质及生殖内分泌的干预作用,探讨其作用机制。方法:将g/粒(以氟西汀计),EliLillyandpanyLimited生产,批号:A140885。苯甲酸雌二醇注射液,1mg/mL,天津金耀氨基酸有限公司生产,批号:0505111。硫酸庆大霉素注射液,8万u/2mL。 1.1.3仪器与试剂 JJ2000型精密电子天平(常熟双杰测试仪器厂),自制大鼠夹尾瓶、冷热水刺激箱、大鼠黑白颠倒箱、电刺激仪、敞箱,GC911γ放射免疫计数器(中国科技大学实业总公司),L/kg)以防感染。 (2
2、)慢性不可预见性应激:依据文献报道[4]适当改良。除A组外,其余各组均孤养合并21d各种不同的刺激,包括电击足底、冰水游泳、热应激、摇晃、夹尾、禁水、禁食和昼夜颠倒等,1种/d。 (3)阴道上皮角化试验:卵巢摘除术后7d行阴道上皮角化试验。左手背位固定大鼠,右手持吸管,其内预先吸有生理盐水0.1~0.2mL。轻轻插入大鼠阴道内0.5~1.0cm,抽吸2~3次,滴1滴吸液于载玻片上。干后以5%美蓝溶液染色,置显微镜下进行细胞学检查。连续5d阴道监测未见动情周期为去势成功。 1.2.2给药方法 应激开始同步给药21d。A组、B组:给予蒸馏水(按体重计10mL/kg),灌胃,1次/d;C组:给
3、予一解合方浸膏,灌胃(8g/kg相当于生药16g/kg),1次/d;D组:给予百优解混悬液,灌胃(4mg/kg),1次/d,同时苯甲酸雌二醇注射液,肌注(0.2mg/kg),隔日1次。 1.3指标检测和方法 1.3.1行为学测定(OpenField法) 本实验采用敞箱为立柱体,高为40cm,长宽各为80cm,周壁为黑色,底面由面积相等的25块组成。以动物穿越地面块数为水平活动得分(crossing),动物穿越1格为1次,如动物沿线行走,以每10cm为1次。以直立次数为垂直活动得分(rearing),动物双足离开底面为标志,无论动物站立多久直至放下双足为1次活动。在实验的第1、7、14、
4、21d分别进行测定。每只动物进行1次,3min/次。 1.3.2糖水消耗实验 刺激第19d,所有动物均单笼饲养,每只动物给予1%蔗糖溶液150mL,同时禁食24h,记录24h饮用1%蔗糖溶液的量。 1.3.3摄食量测定 刺激第20d,所有动物均单笼饲养,供应量(g)减去24h后剩余量(g)即为摄食量。 1.3.45HT、5HIAA测定 应激结束后24h内,将各组大鼠腹主动脉取血后,迅速断头,开颅取脑,置冰盘上操作,竹刀分离出下丘脑,电子天平称重,锡纸包裹,储存于低温冰箱(-80℃)保存,采用高效液相色谱-电化学检测法测定,严格按照要求操作。 1.3.5GnRH、E2、FSH、
5、LH测定 末次给药24h内,取各组大鼠动脉血2mL,置普通试管内,于4℃静置凝固后,低温离心,分离血清、血浆,-20℃保存,采用放射免疫分析法(RIA),按照试剂盒要求操作。 1.4数据处理 实验数据采用(±s)表示,用SPSS11.5统计软件处理,多组均数比较采用方差分析。 2结果 2.1各组大鼠OpenField评分结果比较 见表1。表1各组大鼠OpenField评分结果比较(略)注:与B组比较▲P<0.05,▲▲P<0.01(下同) 2.2各组大鼠糖水消耗量、24h摄取量比较 见表2。表2各组大鼠糖水消耗量、24h摄食量比较(略) 2.3各组大鼠下丘脑5HT、5
6、HIAA含量比较 见表3。表3各组大鼠下丘脑5HT、5HIAA含量比较(略) 2.4各组大鼠内分泌激素含量比较 见表4。表4各组大鼠内分泌激素含量比较(略) 3小结 本研究显示,一解合方能够明显上调更年期抑郁症模型大鼠的E2水平,下调FSH、LH、GnRH水平,进而升高下丘脑5HT、5HIAA含量,显著增加更年期抑郁症模型大鼠的行为学评分、糖水消耗量和24h摄食量。初步证明一解合方治疗本病是通过有效调节更年期抑郁症患者内分泌激素水平而达治疗目的。至于期间的信号转导通路以及一解合方中各组成中药的有效成分及其作用靶点是我们今后研究的方向。 【
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