大型猪场主要猪病抗体水平监测及免疫效果分析

大型猪场主要猪病抗体水平监测及免疫效果分析

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时间:2018-11-13

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1、大型猪场主要猪病抗体水平监测及免疫效果分析近年来,由于多方面的原因,业疫病控制面临着严峻的挑战,猪群的密度越来越大,猪的抵抗力逐步降低,导致越來越错综复杂,给诊断和防制带来很多凼扰。为了摸清规模中猪瘟抗体水平和免疫状况,猪伪狂犬病、猪蓝耳病阳性率和分布情况,有重点地幵展相应的免疫预防,我们检测了永州市24个规模911份血清中的猪瘟、猪伪狂犬及猪蓝耳病抗体,现报道如下。一、材料和方法随机取样采自永州地区24个规模场(未经猪伪狂犬病及猪蓝环病疫苗免疫),其中母猪血清621份,肥育猪207份,种猪(此处专指种公猪,以下同)83份,血清分离后置冰箱21°C保存备用。材料猪瘟正叫间接血凝抗原、阴

2、性和阳性血清,购白中国农科院兰州兽医研宂所,试剂批号为:2001019。猪伪狂犬病、猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒购A美国IDEXX公司,试剂批号为06685—330FT和09265—089HT。96孔血凝板,购自浙江华东医药公司。猪瘟血清抗体水平的检测采用正向血凝试验。具体操作步骤如下:即在96孔血凝板上,每孔加入50ul稀释液,每排第1孔加入待检血清50ul,递比稀释待检血清至血清浓度为1:512,最后50ul丢弃。再在毎孔加入抗原诊断液25ul,置湿盒中于25°C孵育1.5-3h,判定结果。判定标准:凡能使50%的红细胞凝集的血淸最大稀释倍数为该份血淸的抗体效价,猪瘟血清抗体效价高

3、于或等于1:16视为免疫合格。猪伪狂犬病、猪蓝耳病抗体检测参照美国IDEXX公司ELISA诊断试剂盒说明书进行。待检血清分别作1:20(猪伪狂犬病抗体检测)和1:40(猪蓝耳病抗体检测)稀释。取稀释好的待检血清100ul加入包被好的96孔聚苯乙烯诊断试剂盒中,置湿盒内25°C作用30min,取出,用洗涤液充分洗涤3次一5次,甩尽残留液体,每孔加入酶标抗体100Pl,置湿盒内2.5°C作用30min,洗涤。再在每孔中加入TMB底物溶液100u1,置湿盒内25°C;作用15min后,加入终止液100ul,立即置B10—RAD550型酶标仪上650nm处测定。分别按所附计算公式判定是否为血清

4、抗体阳性。二、结果1、猪瘟的免疫状况母猪、肥育猪、种猪猪瘟血清。抗体效价。在所测试的608份母猪血清中,有3份(0.49%)血清样品检测不到猪瘟抗体,45份样品猪瘟血清抗体低于1:8,占检测总数的7.4%;有563份样品猪瘟血清抗体大于或等于1:16,占92.6%;在所测试的157份肥育猪血清中,大于或等于1:16的血清份数为98,免疫合格率为62.4%;78份种猪血清中,有61份血清抗体水平高于或等于1:16,占总数的0.2%。猪瘟免疫合格率排列顺序为母猪〉种猪〉肥育猪。猪血清屮猪瘟抗体效价分布和免疫效果。在所有的843份猪血清屮,有5份猪瘟血清抗体效价为0,占总数的0.6%,有72

5、2份猪瘟血清抗体水平高于、等于1:16,免疫合格率为85.64°%。所调查的24个大型,猪瘟免疫效果相差较大,免疫合格率力57.14%-]00%不等。但绝大多数场免疫水平较高,有14个猪瘟免疫合格率大于或等于90°%。以猪免疫合格率大于80%以上计为免疫合格,则有20个猪瘟免疫合格,占83.33%。可见,规模猪瘟的免疫效果还是比较好的。2、猪伪狂犬病抗体阳性检山率。在所检测的24个规模场中,共有20个场检测出伪狂犬病抗体,占总数的83.33%。911份血清中,365份血清呈伪狂犬病抗体阳性,占整个检测样品的40.07%,其中母猪、肥育猪、种猪伪狂犬病抗体阳性率分别为50.24%,29%

6、、3、猪蓝耳病抗体阳性检出率。24个规模场中,共有17个场检测出蓝耳痫抗体,场阳性率达70.33%。在911份血清中,猪蓝耳病抗体阳性份数为362份,占39.74%,与伪狂犬痫相差无几。其中母猪、肥育猪、种猪阳性率分别为35.4%、48.3%、50.6%。三、讨论本研宄表明,从整体上看猪瘟的免疫状况较好,以猪瘟抗体间接血凝价在1:16以上时能抵抗强毒感染为参考,大多数和猪群能达到这个水平。但也有部分的少数猪,猪瘟抗体滴度低下,不足以抵抗强毒侵袭而发病或成为隐性带毒者,威胁易感猪群。这可能与猪瘟疫苗免疫程序不合理和免疫质景不好有关。调查屮发现,猪伪狂犬病抗体阳性场达20个,占整个调查场数

7、的83.33%。其中母猪抗体阳性率非常高,为50.24%,种猪、肥育猪分别为14.01%和28.9%,情况非常严峻。近期,很多均发生以母猪流产、产死胎、木乃伊胎、弱仔及仔猪出生后几日内急性死亡病例,经诊断大多为此病引起。巾于伪狂犬病可感染各种年龄阶段猪,又可致猪隐性带毒;近来,其毒力和侵袭力有呈动态的持续渐增趋势,并且,病毒的传染链中有鼠类参与,给净化和净化保持带来了相当的难度。实验室和田间试验都己证明PR野毒间、野毒与活苗毒株有重组现象。有些

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