脑力智宝对学习记忆障碍模型小鼠的保护作用

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1、脑力智宝对学习记忆障碍模型小鼠的保护作用【摘要】【目的】观察脑力智宝对学习记忆障碍模型小鼠的保护作用。【方法】（1）选用NIH小鼠32只随机分成假手术组，模型组，脑力智宝低、高剂量组（剂量分别为4、8g·kg-1·d-1）；除假手术组外，其他各组小鼠均进行脑缺血再灌注损伤造模，中药组小鼠连续灌胃给药10d后，采用跳台法观察小鼠的学习记忆能力，检测脑组织中丙二醛（MDA）与一氧化氮（NO）的含量、超氧化物歧化酶（SOD）与谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）的活力，高效液相色谱法检测大脑皮质中游离氨基酸的含量

2、。（2）9月龄NIH小鼠40只随机分成正常对照组，拟衰老模型组，脑力智宝低、高剂量组（剂量分别为4、8g·kg-1·d-1)；除正常对照组外，其他组均腹腔注射50g/LD半乳糖0.5mL连续6周，复制拟衰老模型，同时灌胃给药连续6周后，采用跳台法测试小鼠的学习记忆功能，检测大脑皮质单胺类神经递质去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）及5羟色胺（5HT）的合成前体物质色氨酸（TP）的含量。【结果】（1）脑力智宝能显著提高脑缺血再灌注损伤小鼠的记忆能力（P＜0.01），降低小鼠脑组织中MDA、NO、谷氨酸

3、（Glu）的含量（P＜0.05），提高SOD及GSHPx的活力（P＜0.05或P＜0.01）。（2）脑力智宝能显著改善拟衰老模型小鼠的学习记忆能力（P＜0.05或P＜0.01），提高大脑皮质NE、E及TP的含量（P＜0.05或P＜0.01）。【结论】脑力智宝可以通过提高机体抗氧化酶活性，清除自由基，抑制兴奋性氨基酸与NO的神经毒性作用，调节大脑皮质单胺类神经递质含量等多种途径改善学习记忆功能。【关键词】脑力智宝/药理学；学习记忆障碍/中药疗法；自由基；单胺类神经递质；疾病模型，动物；小鼠脑力智宝主要用于

4、治疗精神发育迟滞、脑瘫、癫痫、脑血管病后遗症、脑外伤后遗症、脑炎后遗症、老年性痴呆等脑病伴发的智力和肢体功能障碍，临床研究表明［1］脑力智宝能明显改善脑梗死后遗症患者运动、语言及精神方面的症状。本文观察了脑力智宝对脑缺血再灌注损伤所致学习记忆障碍小鼠与D半乳糖所致拟衰老学习记忆障碍小鼠的影响，旨在阐明脑力智宝改善学习记忆功能的机理。现报道如下。1材料与方法1.1实验药物脑力智宝由广东高明脑病医疗医药研究院提供，批号：990215，脑力智宝原药粉加12倍量的水浸泡1h，蒸馏提取挥发油3h，4000r/mi

5、n离心10min，药液作为一煎；药渣加入10倍量的水煎1h，4000r/min离心10min，药渣弃去，合并2次药液，水浴浓缩成含生药1g/mL，挥发油加入适量吐温-80助悬，加入水煎液中拌匀，灌胃前按所需浓度稀释。1.2动物（1）清洁级NIH健康小鼠，雌雄兼半，32只，体质量25～30g，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号：99A037；清洁级NIH健康小鼠，9月龄，雄性，40只，由广东省卫生厅实验动物场提供，合格证号：99A069。1.3试剂D半乳糖为上海试剂二厂产品，批号970722；丙二

6、醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）、一氧化氮（NO）、总蛋白试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品；谷氨酸（Glu）、天门冬氨酸（Asp）、甘氨酸（Gly）、γ氨基丁酸（GABA）、邻苯二甲醛（OPA）、3巯基丙酸、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）与色氨酸（TP）均为SIGMA公司产品。1.4仪器直径为30cm的圆形有机玻璃回避反应箱，箱底铺有铜栅，可以连接刺激电流，电压为30V，箱内一角设一直径和高均为5cm的绝缘橡皮塞为安全区；722光栅分光光度计为上海第

7、三分析仪器厂产品；HP1050型高效液相色谱仪为惠普公司产品。1.5脑力智宝对脑缺血再灌注损伤所致学习记忆障碍小鼠的作用1.5.1小鼠脑缺血再灌注损伤模型复制［2］24只小鼠经100g/L乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉后，颈正中切口分离双侧颈总动脉，以无损动脉夹夹闭15min后再通15min，再次夹闭15min。第1次缺血同时放血0.5mL造成低血压，缺血过程保持小鼠体温于36℃左右。8只假手术组小鼠操作同模型组，但不夹闭动脉，不放血。1.5.2分组给药24只脑缺血再灌注损伤小鼠无一只死亡，苏醒后按体质量随

8、机分为模型组，脑力智宝低、高剂量组（中药低、高剂量组），每组8只；后2组分别给予脑力智宝药液4、8g·kg-1·d-1，假手术组和模型组分别给予等容积生理盐水。各组动物均按20mL/kg灌胃，每日1次，连续10d。1.5.3小鼠学习记忆能力测试（跳台法）［3］各组小鼠在末次给药2h后进行跳台训练。训练开始时，先将小鼠放入圆形回避反应箱内熟悉环境2～3min，轻放于平台上，当动物从跳台上跳下四肢接触铜栅时，即给予30V电压刺激，