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《纳洛酮对创伤性休克大鼠血一氧化氮、内皮素的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、纳洛酮对创伤性休克大鼠血一氧化氮、内皮素的影响-->摘 要 探讨纳洛酮(NAL)在创伤性休克治疗中的作用与机制。建立创伤性休克动物模型,根据复苏时是否应用NAL随机分为休克对照组和NAL处理组,于创伤前、休克末及复苏后1、3、5h检测β-内啡肽、一氧化氮、内皮素,并于相应时间点测定组织氧分压,监测血流动力学变化并记录存活时间。结果显示,休克对照组大鼠休克末及复苏后各时间点血β-内啡肽、一氧化氮、内皮素浓度及组织氧分压和伤前比较差异有统计学意义(P 大量研究表明,创伤休克时血中内源性阿片肽,主要是β-内啡肽(β-endorphins,β-EP)浓度增加,参与休克的
2、病理生理过程,拮抗β-EP可明显改善休克时的血流动力学紊乱。纳洛酮(naloxone,NAL)作为阿片受体阻断剂,在循环休克中的作用越来越引起人们的关注[1,2]。但关于创伤性休克过程中拮抗内源性阿片肽对于一氧化氮(ni-tricoxide,NO)、内皮素(endothelin,ET)的影响,目前却研究较少。制作了创伤性休克大鼠模型,于休克复苏时应用NAL,探讨NAL对休克大鼠血浆β-EP、NO、ET浓度和组织氧分压变化的影响,旨在阐明它们在创伤性休克治疗过程中的作用及机制。1 材料与方法1.1 材料 盐酸纳洛酮(北京四环医药科技股份有限公司),内啡肽放免试剂盒(
3、第二军医大学神经生物教研室),NO检测试剂盒(美国Cayman公司),ET-1放免试剂盒(解放军总医院东亚免疫技术研究所)。应用OxyspotTMphosphorimeter(美国,MedicalSystemsCorp,Greenvale,NY)测定组织氧分压。1.2 实验动物和分组 健康成年SD大鼠,体重250±20g,雌雄不拘,共72只,由第一军医大学实验动物中心提供。随机分为休克对照组和NAL处理组,每组36只,实验前禁食12h,禁水8h。1.3 动物模型的复制和实验方法 采用后肢创伤法复制创伤性休克模型[3]。复苏时休克对照组大鼠回输3~5倍失血量的平衡液
4、,使血本论文由.51lung/kg静脉注射。各组36只,其中30只分别于创伤前、休克末和复苏后1、3、5h(每个时间点6只)经股动脉取血检测β-EP、ET、NO,6只于相应时间点测定组织氧分压。取血后补充等量平衡液,监测生命体征并记录存活时间。1.4 血浆β-EP测定 股动脉取血后加入15%EDTA二钠10μl中混匀,4℃离心分离血浆后-20℃保存。严格按试剂盒说明书进行操作,测得游离值cpm,计算每管B/B0百分值,根据实验标准曲线查出样品β-EP的含量,再换算成每毫升血浆中的含量。1.5 血浆ET浓度测定 股动脉取血后注入含10%EDTA二钠30μl和抑肽酶4
5、0μl的试管中,混匀,4℃3000r/min离心10min分离血浆,-20℃保存。测定前置冷水中复融,再次4℃3000r/min离心5min,取上清100μl置于聚苯乙烯试管中,采用放射免疫法测定。1.6 血清NO(NO-3/NO-2)测定 股动脉取血后4℃3000r/min离心10min,将上清移入超滤离心管,4℃14000r/min离心25min,吸取滤液,用Griess法测定NO-2,严格按照试剂盒说明书操作,多孔酶标仪检测,制作标准曲线并检测样品,计算血清NO-3/NO-2浓度。1.7 组织氧分压测定 应用OxyspotTMphosphorimeter利用
6、氧依赖性的淬灭技术测定肝脏、肌肉和小肠的组织表面氧含量。于相应时间点测定组织氧分压,测定前15min按照20mg/kg的量通过股静脉注入磷光探针生理盐水溶液,开腹小心暴露小肠和肝脏,切开皮肤暴露大鼠前肢肌肉,测定时探头距组织表面0•5cm,每次测定取值100次,每次做40个扫描,氧分压取其均值。以上操作在避光条件下完成。1.8 统计学处理 本组数据运用SPSS10•0统计软件进行t检验、方差分析和χ2检验。2 结 果2.1 血浆β-EP浓度的变化 休克对照组血浆β-EP浓度于休克末及复苏后各时间点较创伤前明显升高(P0•05),
7、复苏后3、5h血浆NO浓度较伤前显著升高(P3 讨 论β-EP是一种具有重要功能的内源性阿片肽,它与促肾上腺皮质激素共同于前体促阿黑皮素原,主要在垂体加工而成,外周如肺、胃肠道、胎盘和免疫系统的细胞也可合成并分泌β-EP[4]。正常情况下,循环β-EP的浓度为1~100pmol/L,但是应激情况下,β-EP浓度可升高3~10倍甚至上百倍[5]。β-EP作为神经和内分泌调节物,可以通过影响中枢μ、δ型受体及外周阿片受体,抑制交感神经兴奋和儿茶酚胺、前列腺素的心血管效应,参与创伤失血性休克后的免疫抑制作用[6,7],构成了休克病理生理的重要环节。NO、ET是目前发现的
8、活性最强的
