肠功能恢复汤对肠缺血

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1、肠功能恢复汤对肠缺血【摘要】　　目的观察肠功能恢复汤对肠缺血-再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障的影响，探索多器官功能障碍综合征的新的防治途径。方法SD大鼠45只，随机分为3组：正常对照组、肠缺血-再灌注损伤模型组、肠功能恢复汤治疗组，分别检测各组血清中二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸含量，收集小肠灌洗液并测定灌洗液中的溶菌酶含量，同时取肠系膜静脉血、肠系膜淋巴结、肝及脾组织进行细菌培养，观察细菌移位情况，取回肠组织制成石蜡切片，HE染色光镜下观察，测量小肠黏膜厚度、绒毛高度和隐窝深度，取回肠组织制成电镜标本，透射电

2、镜观察。结果肠功能恢复汤组与模型组相比，血清中DAO和D-乳酸含量均显著降低(P<0.01)，小肠灌洗液中溶菌酶含量显著升高(P<0.01)，细菌移位率显著降低(P<0.01)。肠功能恢复汤组小肠黏膜的病理形态明显好于模型组。结论肠功能恢复汤对肠缺血-再灌注损伤大鼠的肠黏膜屏障具有保护作用。【关键词】肠功能恢复汤肠缺血-再灌注损伤肠黏膜屏障　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectofthedecoctiontohelprecoverintest

3、inalfunctionontheintestinalmucosalbarrierofratsia-reperfusioninjury.MethodsForty-fiveSDratsly:controlgroup,gutischemia-reperfusioninjurygroupanddecoctiongroup.ODS)发生的始动器官［1-2］。肠缺血-再灌注损伤是肠黏膜屏障破坏的基本因素之一。肠功能恢复汤由大黄、丹参等10余味中药组成，具有促进肠蠕动，促进术后肠功能恢复及肠道营养吸收等作用，其对肠道

4、黏膜屏障是否具有保护作用，目前尚未见相关报道。本实验通过观察肠功能恢复汤对肠缺血-再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障的影响，探索MODS新的防治途径。　　1材料与方法　　1.1材料　　SD大鼠45只，SPF级，雌雄不限，体重(248.3±16.3)g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供。T6型新世纪紫外光分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；超速离心机(北京医用离心机厂)；RM2025型组织切片机(德国LEICA公司)；Olympus光学显微镜(日本)；H-600型透射电镜(日本日立公司)；VIDAS-21

5、型自动图像分析仪(德国OPTON)；DAO标准品、邻联二茵香胺购自美国Sigma公司；D-乳酸标准品、D-乳酸脱氢酶购自南京凯基生物发展有限公司；溶菌酶购自中科院生物物理所生化厂，溶壁微球菌由西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系提供。　　肠功能恢复汤：大黄20g(后下)、丹参12g、党参15g、白术15g、陈皮15g、木香12g、桃仁12g、赤芍15g、火麻仁30g、枳实12g等组成，由西安交通大学医学院第一附属医院中药制剂科提供，浓缩煎制成浓度为1∶1药液(含生药1g/mL)，灭菌处理后4℃冰箱内保存

6、。　　1.2肠缺血-再灌注损伤动物模型［3］的建立　　大鼠于造模前24h禁食，自由饮水。称重后给予腹腔注射100mL/L水合氯醛(30mg/100g)麻醉，实验台上仰卧固定，腹部脱毛后常规消毒铺无菌巾，取腹部正中切口进腹，暴露肠系膜上动脉(superiormesentericartery,SMA)，各组分别用无创夹夹闭其根部45min，松夹即为再灌注。　　1.3动物分组　　45只大鼠随机分为3组，正常对照组(controlgroup)15只：正常大鼠生理盐水灌胃；肠缺血-再灌注损伤模型组(I/Rgroup

7、)15只：造模后，生理盐水灌胃；肠功能恢复汤治疗组(decoctiongroup)15只：造模后即给予肠功能恢复汤灌胃；均为1mL/100g，2次/日，连续2日。　　1.4血清二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸含量的测定　　各组动物于造模成功48h后，用100mL/L水合氯醛(30mg/100g)麻醉，严格无菌操作下采取门静脉血，采用黎君友等［4］的分光光度法测定血清DAO活性；采用Brandt等［5］的分光光度法测定血清D-乳酸含量，均严格按说明书操作。　　1.5小肠灌洗液中溶菌酶含量的测定　　麻醉后立即剖

8、腹切取从屈氏韧带到距回盲部5cm处的肠管，用生理盐水洗去浆膜上的污物，然后以100mL/L乙酸50mL灌洗小肠，将小肠灌洗液在4℃，5000r/min，离心30min，收集上清液装入透析袋，透析18h除去乙酸以及其他小分子物质，然后冷冻干燥，得到小肠灌洗液乙酸溶解物，用琼脂平板扩散法测其溶菌酶的含量。　　1.6细菌培养　　麻醉后，无菌条件下打开腹腔，分别取肠系膜淋巴结(mesentericlymphnode,MLN)、肝及脾组