大鼠小肠移植模型中移植肠的选择

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1、大鼠小肠移植模型中移植肠的选择【摘要】目的：比较大鼠异位小肠移植模型中不同节段移植肠的病理学变化及移植肠存活率.方法:将近交系不等；D组（n=80）亦行异位节段性小肠移植，移植肠部位取近段小肠，长度15～50cm不等；各组术后常规补液，给予抗生素.每日观察移植肠造瘘口颜色及分泌物.并于术后1，7，14，30d于移植肠近端造口内注入麦芽糖溶液，各组随机抽取20只受体于术后7，14，30d统一自颈外静脉置管处采血1mL，测量注入麦芽糖前后血糖值并换算出血糖吸收值.移植鼠濒临死亡时取材，行组织病理学检测.结果：B组受

2、体的病理学变化程度较C，D组明显，大鼠的存活率亦较低.B，C，D各组血糖吸收值变化无统计学差异.结论：在大鼠小肠移植模型的移植肠的选择中，节段性较全小肠移植效果好；节段性移植肠的选择以取距屈氏韧带5cm、长度约15～20cm移植肠为宜.【关键词】小肠/移植；大鼠；移植肠0引言大鼠小肠移植模型的建立至今已有30年的历史［1］，在此期间已有不少的创新和发展，但是由于技术复杂和死亡率高，仍然严重妨碍了这种模型的广泛应用.我们在长期的小肠移植模型建立的实验中发现，不同节段移植肠的选择是影响模型存活率的重要因素.我们采用

3、不受移植免疫因素影响的近交品系不等；D组（n=80）亦行异位节段性小肠移植，移植肠部位取近段小肠，长度15～50cm不等.供、受体均在代谢笼内禁食10～12h，自由饮用16万U/L庆大霉素+50g/L葡萄糖氯化钠溶液.动物麻醉按10μL/g腹腔内注射10g/L氯胺酮，可维持1～2h，若术中动物苏醒，可追加原始剂量的1/4.1.2.1.2供体手术沿腹部中线纵形切口入腹后,首先行全结肠切除术.①B组：分别在距Treitz韧带1cm和距回盲部2cm处切断空肠及回肠；②C组：取中、远段小肠，长度15～50cm不等；③D

4、组：于距屈氏韧带5cm为近端，取小肠约20cm.两端均切断、结扎,游离肠系膜上静脉、门静脉至肝门处，尽量剥净周围胰腺组织，游离带肠系膜动脉的一段腹主动脉,阻断已分离的腹主动脉近心端,经肾下腹主动脉行小肠原位灌洗，灌洗液为4℃肝素化乳酸林格液约5～10mL,于40cm高度灌洗移植肠段至肠管颜色苍白，同时腹腔内充满冰盐水降温.灌洗的同时于肝门处离断门静脉,将5F内径cuff管套入门静脉，翻转门静脉使其内膜向外翻于套管上，0/6号丝线结扎固定将移植肠取下放入4℃乳酸林格液中保存.1.2.1.3受体手术首先行上腔静脉置

5、管，参照，显露颈外静脉，向心插入1～1.5cm达上腔静脉固定.在插管过程中持续以1mL/h输注生理盐水，防止导管内凝血堵塞及气体进入血管.麻醉同供体，开腹后游离左肾静脉，切除左肾.显露左肾动脉下方腹主动脉约1.5cm,在其上、下方阻断血流，移植肠以冰盐水纱布保护，用0/9号无损伤缝合针行肠系膜上动脉、腹主动脉端侧吻合；移植肠门静脉与左肾静脉利用5F内径Cuff管行袖套式吻合，结扎固定.去除阻断动、静脉的显微外科止血夹，即见移植肠肠系膜上动脉搏动明显,移植肠肠管红润，腹腔内倒入37℃温盐水复温.移植肠近端于左上腹

6、造口、末端于左下腹造口.受体于开腹前、血管吻合后及关腹后各补含4g/L头孢唑啉钠的平衡盐液2～3mL,共6～8mL.1.2.1.4术后观察术后每日称体质量；观察移植肠造口粘膜颜色及分泌物；术后1，7，14，30d于移植肠近端造口内注入50g/L麦芽糖溶液1mL，分别于注入前及注入后30min自颈外静脉置管处采血1mL，测量注入麦芽糖前后血糖值并换算出血糖吸收值［3］.移植组在大鼠体质量降至130～150g，极度消瘦，毛发脏乱而无力梳理（濒临死亡）时，取移植肠管进行病理学检查.生存时间超过30d被认为能够长期存活

7、［4］.1.2.2移植肠粘膜组织形态学分析［5］取移植小肠，用100g/L甲醛固定后修剪为1cm×1.5cm大小，脱脂、石蜡包埋、切片，苏木精伊红染色.统计学处理：数据采用x±s表示，以完全随机设计资料的方差分析方法利用统计软件SPSS10.0进行统计分析，P<0.05认为差异有显著性.2结果2.1移植大鼠存活时间A组存活时间不受限制；B组受体平均存活时间为(18.0±2.1)d，术后精神状况逐日下降，消瘦明显，产生大量腹水；C组受体平均存活时间为(35.3±2.3)d，大鼠术后苏醒较快,苏醒后即正常活

8、动；D组受体平均存活时间为(38.0±5.0)d，术后精神好，对刺激反应灵敏.其中B组与D，C组相比存活时间明显缩短(P<0.05)，而D，C组存活时间无明显差异.2.2移植大鼠体质量、移植肠造口粘膜颜色及分泌物变化A组体质量无变化，B组术后的体质量下降明显，C，D组体质量亦下降，但其下降幅度较B组明显缓慢.B组大部分受体移植肠造口粘膜水肿明显、伴青紫淤血，分泌的肠液较粘稠，不断