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时间:2018-09-22
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1、实验室常用技术参数资料实验室常用技术参数资料一、核酸及蛋白质常用数据1.核苷三磷酸的物理常数化合物分子量λmax(pH7.0)1摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值OD280/OD260ATP507259154000.15CTP48327190000.97GTP523253137000.66UTP484262100000.38dATP494259152000.15dCTP46727193000.98dGTP507253137000.66dTTP48226796000.712.常用核酸的长度与分子量核酸核苷酸数分子量λDNA4
2、8502(双链环状)3.0×107pBR3224363(双链)2.8×10628SrRNA48001.6×10623SrRNA37001.2×10618SrRNA19006.1×10519SrRNA17005.5×1055SrRNA1203.6×104tRNA(大肠杆菌)752.5×1043.常用核酸蛋白换算数据 (1)重量换算 1μg=10-6g 1pg=10-12g 1ng=10-9g 1fg=10-15g (2)分光光度换算: 1A260双链DNA=50μg/ml 1A260单链DNA=30μg/ml
3、 1A260单链RNA=40μg/ml (3)DNA摩尔换算: 1μg100bpDNA=1.52pmol=3.03pmol末端 1μgpBR322DNA=0.36pmol 1pmol1000bpDNA=0.66μg 1pmolpBR322=2.8μg 1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿 1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿 1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿 (4)蛋白摩尔换算: 100pmol分子量100,000蛋白质=10μg 100pmol分子量50,000蛋白质=5μg
4、 100pmol分子量10,000蛋白质=1μg 氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿 (5)蛋白质/DNA换算: 1kbDNA=333个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质 10,000MW蛋白质=270bpDNA 30,000MW蛋白质=810bpDNA 50,000MW蛋白质=1.35kb 100,000MW蛋白质=2.7kbDNA4.常用蛋白质分子量标准参照物(1)高分子量标准参照(2)中分子量标准参照(3)低分子量标准参照肌球蛋白分子量磷酸化酶B97,400碳酸酐酶31,00肌球蛋白212,000牛血清白
5、蛋白66,200大豆脻蛋白酶21,500β-半乳糖甘酶B116,000谷氨酶脱氢酶55,000抑制剂 磷酸化酶B97,400卵白蛋白42,700马心肌球蛋白16,900牛血清白蛋白66,200醛缩酶40,000溶菌酶14,400过氧化氢酶`57,000碳酸酐酶31,000肌球蛋白(F1)8,100醛缩酶40,000大豆脻蛋白酶21,500肌球蛋白(F2)6,200 抑制剂 肌球蛋白(F3)2,500 溶菌酶14,400 5.常用DNA分子量标准参照物λDNA/HindⅢλDNA/EcoRⅠλ/HindⅢ+EcoRⅠpBR322/
6、HaeⅢ23130212262122758712394167421514840510465575804497350489436156434268458802322484335304346420273530202726757564 190423451125 158421321 137519218 97418411 8311247 564 125 续上表pBR322/HinfⅠφχ174/HinfⅠφχ174/HaeⅢφχ174/TapⅠ1631726140135329145177131181078117550655310
7、087240439650082603327344417663102312984134828114122131142271872202494023454154200241943375151 11820 72 二、常用缓冲液 1.分子克隆常用缓冲液 2.磷酸缓冲液 (1)25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※pH1mol/LK2HPO4(ml)1mol/LKH2PO4(ml)5.88.591.56.013.286.86.219.280.86.427.872.26.638.161.96.849.750.37.061.53
8、8.57.271.728.37.480.219.87.686.613.47.890.89.28.094.06.2 (2)25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※pH1mol/LNa2HPO4(ml)1mol/LNa
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