SN0170-1992出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法.pdf

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1、SN中华人民共和国进出·口商品检验行业标准SN0170一92出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法MethodfordetectionofSalmonellae(includingArizona)infoodforexport1992门2一28发布1993一05一01实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发布中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品沙门氏菌属SN0170一92(包括亚利桑那菌)检验方法代替za8一83MethodfordetectionofSalmonellae(includingArizona)infoodforexport1主题内容与适用范围本标准规定了冻猪肉

2、、冻鸡肉、鸡蛋黄粉和冰鸡蛋白中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)的检验方法。本标准适用于冻猪肉、冻鸡肉、鸡蛋黄粉和冰鸡蛋白中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验。其他食品可参照使用。2样品制备及增菌培养2.1肉类2，1如为冷冻产品，应在45C以下不超过15min，或在2^5℃不超过18h解冻。若不能及时检验应置于一15C左右保存。非冷冻而易腐的食品，置于4℃冰箱保存。2.1.2以无菌操作，称取剪碎后的瘦肉样品25g,t于灭菌均质杯内，加入25mL缓冲膝水增菌液.以8000^-10000r/min均质1min，移入盛有200mL缓冲陈水增菌液的500mL广口瓶内，混合均匀，如pH低于6.6，用灭菌1m

3、ol/L氢氧化钠溶液.调pH至6.8士。.2，于37℃水浴培养4h(以增菌液达到37C时算起)，进行前增菌;其后.移取10,nL转种于盛有100mL四硫磺酸盐煌绿增菌液的250mL玻璃瓶内，摇匀，于42士1C培养20士2h，进行选择性增菌。必要时，同时另称取25g剪碎的瘦肉样品.加入25mL亚硒酸盐胧氨酸增菌液，同样进行二;质。其后，移入盛有200r"L亚硒酸盐胧氨酸增菌液的500mL广口瓶内，混合均匀，如pH低于6.6,泪灭菌1mol/L氢氧化钠溶液调pH至6.310.2，于37C培养24士2h，进行直接选择性增菌。2.2蛋品2.2.1冰蛋品(冰鸡全蛋、冰鸡蛋白、冰鸡蛋黄)2.2.1.1

4、按2.1.1解冻和保存样品。2.2.1.2以无菌操作称取样品25g置于盛有225mL四硫磺酸盐煌绿增菌液的500mL厂口瓶内.混合均匀，如pH低于6.6.用灭菌1mol/L氢氧化钠溶液调pH至6.8士。.2，于37℃培养24士2h，进行直接选择性增菌。2.2.2干蛋品(鸡全蛋粉、鸡蛋白片、鸡蛋白粉、鸡蛋黄粉)以无菌操作将样品碾碎后，称取25g加入盛有225mL缓冲陈水增菌液的500mL广口瓶内(瓶内事先盛有直径3^-4mm的玻璃珠约50粒)，振荡10min，如pH低于6.6，用灭菌1mol/L氢氧化钠溶液调pH至6.8士。.2，于37C培养20^-24h，进行前增菌;其后，移取10mL转种

5、于盛有100mL亚硒酸盐胧氨酸增菌液的250mL玻璃瓶内，混匀，于42士1℃培养20士2h，进行选择性增菌。中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准1993一05一01实施1SN0170一923分离培养3.1将增菌培养液摇匀，以无菌操作，用直径3mm的接种环分别挑取1环.分别划线于表面无凝结水的亚硫酸秘和胆硫乳琼脂平板各一个(必要时亚利桑那菌琼脂平板可参照使用)，于3?C培养24士Zh，3.2观察各琼脂平板上有无典型或可疑沙门氏菌属的菌落，如无典型或可疑菌落，应再继续培养24士Zh。沙门氏菌属的菌落特征见表1.表1沙门氏菌属菌落特证琼月旨平板棕褐色或灰色至黑色。有时有金属

6、光泽亚硫耽秘琼脂围培养基呈棕色或黑色，有些菌株呈色.周围培养荃不变或微变暗无色半透明自黑匕中心或几乎全为黑色。有乳糖阴性菌株，相似于沙门氏菌菌落，乳糖胆硫乳琼脂些菌株无色半透明阳性菌株为价红色有暗色中心粉红色有黑色中心有时为全黑色.周围培黄色有暗蓝色中心，周围培养基中有黄色沉亚利桑那茵凉脂养基呈红色，被发醉卫矛醉或蔗糖的细菌包淀物围时，菌落边缘可为浅黄色4鉴定4.1筛选试验4.1.1每个琼脂平板至少应挑选2个典型或可疑菌落，分别用接种针接种赖氨酸脱梭酶培养基或尿素酶琼脂一管，接种后无须灭菌接种针，直接再接种三糖铁琼脂一管于37℃培养24士Zh。4.1.2挑取菌落后的琼脂平板，应置于4~8℃

7、至少保留24h，以备必要时复查。4.1.3按表2或表3结果进行判断。表2三塘铁琼脂和籁氨酸脱羚酶培养基筛洗三糖铁琼脂赖氨酸脱初步判断斜面底层产气硫化氢矮酶培养圣KA+(一)一卜(一)+可疑沙门氏菌属KA斗(一)+(一)可疑沙门氏菌属AA一+(一)十(一)一尸可疑亚利桑那菌A一+(一)+(一)非沙门氏苗属K}一盒十/一}'一十긯一+/一非沙门氏菌属注:K一产钱;十一阳性反应。〔一)一少见反应汰一产酸;一一阴性反应;+/一一