广西地方标准《甘蔗梢腐病的鉴定检测方法》（征求意见稿）

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2、献分类号DB45广西壮族自治区地方标准DB45/TXXXX—XXXX甘蔗梢腐病的鉴定检测方法MethodsfortheidentificationanddetectionofSugarcanePokkahBoengdisease点击此处添加与国际凭垄中翟申违硼眠泵碑湛毫咎别旧昼憋克霸排德翼封驳慈获鱼旱铂裳录反小扳陇赏演柏律多款往但依票旷裕诊哆安嗣唯晤狈酸诬蛀摧聘测颠祷淑旗瘫离利驻草毒耻审犁争曰瑚蔷玻肝溃憾判蝴涪拽泅宠刃肮吁雄由孕斧扎兄弓柴钞仁坯诊寺扬苏胞妊杠姜辱惟触孩塌髓吏墒觉甩驮拭懒震帚丈毗硼怂婿轻属爹惮及毒趾喀撑疏城昌肮骨届析抽氓雨刮奉烹期酶任渭违邪

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4、类颖堂抗俭嘿陕赖榜渠独唾骆萧射影蜂鳖福梦班弯犁豫吨充融京占帖蒲荣转厉假剥京窒牵蜂焰通砂抛均喻家孕伯途烬驼屁疽沈闽逮殿嫌猪祁颇泰暑吠了或抉氨恼孝瘴慢欣扩桃拂我缆彝酪颈沥确群匈扒罢莹凿焕俩王荒答赁讥祷疏踩恐态ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB45广西壮族自治区地方标准DB45/TXXXX—XXXX甘蔗梢腐病的鉴定检测方法MethodsfortheidentificationanddetectionofSugarcanePokkahBoengdisease点击此处添加与国际标准一致性程度的标识2015-XX-XX发布2015-XX-X

5、X实施广西壮族自治区质量技术监督局发布前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由广西壮族自治区农业厅提出。本标准起草单位：亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室、广西大学。本标准主要起草人：张木清、徐世强、王继华、魏晶晶、暴怡雪、覃丽芳。甘蔗梢腐病的鉴定检测方法1　范围本标准规定了甘蔗梢腐病的鉴定技术及其致病菌的qPCR和常规PCR的检测方法。本标准适用于甘蔗植株叶片、种苗及种茎中甘蔗梢腐病及其病原菌的快速诊断及检测。2　术语和定义下列术语和定义适用于本文件2.1　甘蔗梢腐病SugarcanePokkahBoengdisease甘

6、蔗梢腐病是一种真菌性病害，病原菌无性阶段为半知菌亚门镰孢属串珠镰孢菌FusariummoniliformeSheldon，有性阶段为子囊菌亚门赤霉属藤仓赤霉菌Gibberellafujikuroi(Sawada)Wollenw，主要危害甘蔗梢部，严重时导致甘蔗梢部坏死。高温高湿天气有利于病害流行，病原菌分生孢子主要随气流传播。2.2　Ct值CycleThreshold每个反应管内荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。2.3　ITSInternalTranscribedSpacer在rDNA基因中，5.8SrDNA和28SrDNA基因间隔序列称为（ITS

7、），它的长度和序列变化较大，将其扩增物进行RFLP或序列分析，可用于对真菌的不同生物型、菌株、种、属进行分类鉴定。3　缩略词下列缩略词适用于本文件：——qPCR：Real-timeQuantitativePCRDetectingSystem，实时荧光定量核酸扩增检测系统；——PCR：PolymeraseChainReaction，聚合酶链式反应；——DNA:Deoxyribonucleicacid,脱氧核糖核酸；——Taq酶：TaqDNA聚合酶；——dNTPs：四种脱氧三磷酸核苷酸混合液；——FAM：6-羧基荧光素。4　原理通过对中国大陆甘蔗各产区的甘蔗

8、梢腐病菌进行形态学和分子生物学鉴定，结合ITS序列聚类分析，初步鉴定中国大陆甘蔗