毕业论文（设计）温度对中华鳖性腺发育与性比影响

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1、温度对中华鳖性腺发育与性比影响1前言1.1研究现状1.1.1原始生殖细胞的发育与分化原始生殖细胞（primordialgermcells，pGCs）是具有特殊的繁殖和分化能力并最终产生雌雄配子的细胞，是配子的始祖细胞[1,2]。原生殖细胞以其较大的体积易与其周围的体细胞区别。它细胞呈圆形或椭圆形，直径约10~20μm；内含一个较大的细胞核，直径约6~10μm，在细胞核内常染色质均匀分布，有一个或两个的核仁，核膜十分明显。PGCs的数目始终局限在少数，在昆虫，两栖动物，哺乳动物和鱼类中，PGCs的数目大约是20-60个[3]。PGC

2、s经过分化、迁移进入生殖嵴分化成生殖细胞。不同动物PGCs进入生殖嵴的迁移方式不同，在生殖嵴（生殖腺原基）发生时，PGCs在生殖嵴中进行分化。PGCs在迁移过程中不断分裂增殖，随胎龄增长，性别发生分化，生殖嵴分化为雄性的睾丸或雌性的卵巢，PGCs形成精子或卵子。爬行动物的PGCs来源于早期胚胎的外胚层细胞，然后经过明区的中部迁移到明区与暗区的交界处称为生殖新月的区域，在生殖新月区内增殖。当生殖新月区有毛细血管血管形成时，PGCs就进入到血管中，爬行动物的PGCs主要是借助血液循环进行迁移的，到达发育中的生殖腺（生殖嵴）时离开血液循

3、环，通过间质迁移到生殖嵴中[4]。中华鳖的原生殖细胞起源于外胚层，孵化约24h后迁移至生殖新月区增殖，在增殖后，沿脐肠系膜中的血管迁移至脐肠系膜迁移到生殖嵴附近，沿肾脏与生殖嵴连接处迁移到生殖嵴。中华鳖生殖嵴最早是从孵化开始8d开始隆起，位于脊柱两侧、肾脏腹侧内前方。生殖嵴隆起后，原生殖细胞PGCs迁移至生殖嵴。孵化开始第8~12d，生殖嵴与肾脏之间界限逐渐明显，到13d发育成原始性腺，原生殖细胞（PGCs）开始向雌雄方向分化。从孵化第13d到22d，原始性腺开始向雌雄方向分化，皮质发育的向卵巢方向分化，髓质发育的向精巢方向分化。

4、从组织切片可以观察到向雌性方向分化的胚胎，性腺的皮质开始出现个体较大的细胞；向雄性方向分化的胚胎，性腺髓质细胞和细胞核体积开始缩小，输卵管、皮质开始退化，输卵管腔逐渐缩小，直到输卵管完全退化[5,6]。1.1.2性别决定类型与机制性别决定（sex20determination）是指细胞内遗传物质对性别分化的作用。性别决定的物质基础是受精卵的染色体组成。不同生物的性别决定方式不同，常见的性别决定类型有：染色体决定型（如人类和果蝇等XY型、蛾类等ZW型）；环境决定型（如很多爬行类动物）；孤雌生殖等等。1.1.2.1基因型性别决定基因型

5、性别决定主要有两种类型：XY型和ZW型，XY型或ZZ型将发育成雄性，而XX型或ZW型将发育成雌性。在哺乳动物中，位于Y染色体上的SRY（SexdetermingofYchromosome）基因是睾丸决定因子TDF（Testisdetermingfactor，TDF）的最佳候选基因，SRY基因的缺失可以使动物个体发育过程出现性反转。SRY基因位于Y染色体短臂紧邻拟长染色质区，编码的蛋白质即HMG（HighMobilityGroup）盒，具高度的保守性和特异性。很多基因所编码的蛋白质已被证实有HMG盒，现已把编码蛋白质与HMG盒有60

6、%同源性的基因，称为Sox基因（SRY-relatedHMG-boxgene）[7]。通过SRY与Sox3相互作用来调节Sox9从而影响睾丸的发育[8,9]：在雄性中，SRY抑制Sox3，由于Sox9没有Sox3的抑制而得以发挥作用，诱导睾丸发育，在雌性中无SRY，使得Sox3的产物抑制Sox9，因而无睾丸发育。总之，性别决定及性腺分化取决于以上各基因间的相互作用和相互影响。1.1.2.2环境型性别决定环境型的性别决定指子代的性别由环境中的影响因子决定，多数两栖爬行类的性别决定由卵的孵化温度所决定，到目前为止，ESD机制的物种均无

7、异型染色体的分化。关于ESD机制，综合国内外研究，主要有下面几种：1）在生理水平上，子代的性别分化主要受到类固醇激素的影响和控制，孵化温度的改变能影响芳香化酶和5α-还原酶的活性，进而控制雌、激素转化，进而决定了个体的性别分化[10]。2）分子水平研究发现：Sf1、Wt1、Mis、Dax1、Sox9和Dmrt1等基因的表达都能够受到温度的影响，参与了龟鳖类性别分化。有研究显示，Sf1能控制细胞表达性腺类固醇激素发生酶，包括芳香化酶在内[11]；有学者对红耳龟早期胚胎中（15期以前）Mis的表达的研究显示，Mis的表达可以限制缪勒氏

8、管的形成，从而使其胚胎向雄性方向发育[12]；八孔海龟（Lepidochelysolivacea）的Sox9表达也受孵化温度的调控：在孵化胚胎的温度敏感期（21~25期）Sox9在胚胎发育能适应的范围内都有表达，但是孵化胚胎发育到26~27期时，S