川芎嗪对内皮祖细胞的功能影响

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1、川芎嗪对内皮祖细胞的功能影响作者：林杰徐力辛杨德业黄伟剑林捷张怀勤【摘要】　　［目的］观察川芎嗪（TMP）对体外培养内皮祖细胞（EPCs）功能影响和损伤保护作用，探讨它对冠心病的治疗作用。［方法］密度梯度离心法获取脐血单个核细胞,培养7天后,收集贴壁细胞，流式细胞仪、荧光显微镜法、matrigel试剂鉴定EPCs。收集贴壁细胞并分组为正常对照组，TMP（5mg/L、25mg/L、100mg/L、200mg/L）干预组，H2O2（500μmol/L）氧化应激模型组，TMP（5mg/L、25mg/L、100mg/L、200mg/L）和H2O2共同干预组，培养24h

2、。分别观察EPCs增殖、粘附能力及凋亡率。［结果］与正常对照组相比,（5mg/L、25mg/L、100mg/L）TMP干预组对脐血来源的EPCs增殖、粘附功能无显著影响，（200mg/L）TMP干预组显著抑制脐血来源的EPCs增殖、粘附；与H2O2氧化应激损伤组相比，（5mg/L、25mg/L、100mg/L）TMP能显著降低H2O2对EPCs增殖、粘附抑制作用及细胞凋亡。［结论］低浓度TMP能保护EPCs氧化应激损伤，改善增殖、粘附能力，减少细胞凋亡，但对正常培养的EPCs增殖和粘粘功能无显著的促进或抑制作用。【关键词】川芎嗪内皮祖细胞过氧化氢缺血性疾病冠心

3、病　　Abstract：［Objective］Thisstudywastoinvestigate10theeffectofTMPonfunctionofEPCsinnormalorhydrogenperoxide（H2O2）inducinginjurymodelcellculture，andtoapproachatherapytocoronaryheartdisease（CHD）.［Method］Totalmononuclearcellswereisolatedfromthecordbloodbyficolldensitygradientcentrifugat

4、ion，culturedinvitro.Afterthecellsculturedfor7days，identifiedthembycellmarkersandtheabilityofintakingtheacLDL，andmadesuretheywereEPCs.Todividethecellsintothreegroups，TMP（5,25,100，200mg），H2O2（500μΜ）modelandTMPtogetherwithH2O2，culturedfor24handthendetectedthefunctionandapoptosisofEPCs

5、.［Result］Versustocontrolgroup，theTMP（5，25，100mg）groupshadnoimportanteffectontheproliferationandadhesionofEPCs，butTMP（200mg）grouphadnegativeeffectonEPCs.VersustoH2O2modelgroup，TMP（5，25,100mg）preincubatedgroupshadimportantprotectiveeffectonEPCsinproliferation，adhesionandapoptosis.［Con

6、clusion］TMPcouldprotectEPCsfromoxidativestressinjury，buthadlittlebenefittoEPCsinnormalincubation.　　Keywords：tetramethylpyrazine；endothelialprogenitorcell；hydrogenperoxide；ischemicdisease；coronaryheartdisease10　　内皮祖细胞（EPCs）的概念提出已有10年，目前普遍认为EPCs的表面标记为CD34、CD133、KDR，能进一步分化为成熟血管内皮细胞参与血管

7、新生的干/祖细胞。川芎嗪（TMP）是从活血化瘀中药川芎的根茎中提取的有效成分,对脐静脉内皮具有促增殖和内皮损伤保护作用［1］，并能抑制内皮细胞增殖及新生血管形成［2］，已应用到部分临床心、脑血管等疾病的治疗并取得较好的疗效［3］。而TMP对EPCs功能影响和损伤及保护作用，尚未见报道。本实验旨在观察TMP对体外培养正常和损伤EPCs的功能影响。　　1材料和方法　　1.1材料6％羟乙基淀粉购自Sigma公司，纤维连接蛋白购自Roche公司，VEGF购自PeprotechEC公司，PECD34购自Caltaglaboratories,FITC－VEcadher

8、in购自Bendersystem公司，