snt1675-2011 真鲷虹彩病毒检疫规范

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1、版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖/犜1675—2011代替SN/T1675—2005真鲷虹彩病毒病检疫技术规范犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉狉犲犱狊犲犪犫狉犲犪犿犻狉犻犱狅狏犻狉狌狊犱犻狊犲犪狊犲(犚犛犐犞犇)20110531发布20111201实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准真鲷虹彩病毒病检疫技术规范SN/T1675—2011中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:

2、100045网址www.spc.net.cn电话:6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本880×12301/16印张1字数25千字2011年11月第一版2011年11月第一次印刷印数1—1600书号:155066·222639定价18.00元标准分享网www.bzfxw.com免费下载版权所有·禁止翻制、电子发售犛犖/犜1675—2011前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1675—2005《鱼真鲷虹彩病毒聚合酶链反应操作规程》。本标准与SN/T1

3、675—2005相比,主要技术差异如下:———增加现场诊断;———增加间接荧光抗体试验;———增加病毒的细胞分离;———对原标准中聚合酶链式反应(PCR)进行修改。本标准修改采用了OIE《水生动物疾病诊断手册》(2009版)第2.3.7章。本标准与OIE《水生动物疾病诊断手册》(2009版,第2.3.7章)相比,主要差别如下:———删除了OIE手册中真鲷虹彩病毒病防控和流行病学内容;———重新编排了格式。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国深

4、圳出入境检验检疫局。本标准主要起草人:吴文忠、兰文升、刘荭、吴海峰、方成俊、张伯强、郑腾。Ⅰ标准分享网www.bzfxw.com免费下载版权所有·禁止翻制、电子发售犛犖/犜1675—2011真鲷虹彩病毒病检疫技术规范1范围本标准规定了真鲷虹彩病毒病(redseabreamiridovirusdisease,RSIVD)的临床和实验室检测标准方法。本标准适用于水生动物真鲷虹彩病毒病的检测和诊断。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件

5、,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T18088出入境动物检疫采样。3概述真鲷虹彩病毒病(RSIVD)是养殖海水鱼类的一种重要疾病,被列入世界动物卫生组织(OIE)水生动物疫病名录,是水生动物及其产品的国际贸易中,所监测的鱼类重要疾病之一(参见附录A)。对RSIV的监测、检测和诊断方法见附录B。4缩略语下列缩略语适用于本文件。CPE(cytopathiceffect):细胞病变IFAT(immunofluorescentantibodytests):免疫荧光抗体试验ISKNV(infectioussp

6、leenandkidneynecrosisvirus):传染性脾肾坏死病毒PCR(polymerasechainreaction):聚合酶链式反应RSIVD(redseabreamiridoviraldisease):真鲷虹彩病毒病RSIV(redseabreamiridoviralvirus):真鲷虹彩病毒5主要仪器和设备5.1普通倒置显微镜。5.2荧光显微镜。5.3电子显微镜。5.4热循环扩增仪(PCR仪)。5.5恒温培养箱。5.6离心机。5.7凝胶成像仪。5.8DNA电泳系统。1标准分享网www.bzfxw.c

7、om免费下载版权所有·禁止翻制、电子发售犛犖/犜1675—20116主要试剂和材料6.1GF(Gruntfin)细胞系:由国家质量监督检验检疫总局指定单位提供。6.2L15培养基(含Eagle’s平衡盐溶液)。6.3小牛血清(FBS)。6.4标记了异硫氰酸荧光素(FITC)的抗小鼠的抗抗体。6.5抗RSIV的单克隆抗体:由国家质量监督检验检疫总局指定单位提供。6.6PCR有关试剂。6.7RSIV:由国家质量监督检验检疫总局指定单位提供。6.8引物:引物1:1F:5’CTCAAACACTCTGGCTCATC3’

8、引物2:1R:5’GCACCAACACATCTCCTATC3’引物1和引物2可扩增RSIV和ISKNV中570bp的基因片段。引物3:4F:5’CGGGGGCAATGACGACTACA3’引物4:4R:5’CCGCCTGTGCCTTTTCTGGA3’引物3和引物4只扩增RSIV568bp的基因片段。7抽样出境检疫抽样应在原产养

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