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1、猪场仔猪大肠杆菌病原药敏试验畜牧与饲料科学AnimalHusbandryandFeedScience猪场仔猪大肠杆菌病原药敏试验岑吉先(贵州省望谟县农业林业和扶贫开发局,贵州望谟552300)摘要:试验通过对大肠杆菌病原进行分离,提纯鉴定和药敏实验,找出敏感药物,并针对性地选择有效药物,以期减少因临床盲目投药而引起药物的超量残留,耐药菌株的增多或交叉耐药,从而有效避免人为导致食品安全,环境污染的问题.关键词:仔猪大肠杆菌:病原:药敏试验中图分类号:$858.285.12文献标识码:A1研究意义大肠杆菌是人和畜禽肠道常栖菌,其中某些特殊血清型
2、对人和动物有致病性.成为制约养猪业发展的重要疾病.为此,笔者进行了猪场仔猪大肠杆菌病原药敏试验.2技术路线①猪场采集病料;②实验室分离提纯;③生化鉴定;④药敏试验;⑤确定治疗方法.3研究方法通过病原微生物的分离,提纯,鉴定及药敏试验,找出敏感药物,并进一步筛选和确定其方剂进行治疗试验,以达到控制和治疗仔猪大肠杆菌病的目的.4材料设备4.1器材灭菌锅,培养皿,试管,杜氏管,灭菌棉签,酒精灯,接种棒,滤纸,离心机,镊子,恒温箱,烘干箱,试管架,电炉,烧瓶,牛津杯,无菌工作台,冰箱,电子秤,标记笔,试管刷,吸耳球.4.2药敏纸片pH值试纸,先锋V
3、,壮观霉素,环丙沙星,庆大霉素,头孢他啶,氟哌酸,氯霉素,复达欣,四环素,呋哺妥因,链霉素,丁胺卡那,痢特灵,左氟沙星,均由杭州天和微生物试剂有限公司生产.4.3鉴定药品及培养基麦康凯琼脂(上海医学化验所试剂厂生产,批号为9030401),其他培养基均按《兽医微生物实验指导》(姚火春主编,第2版,中国农业出版社)配制.5试验方法5.1病原分离取猪场临床诊断有严重腹泻及水肿的死亡小猪淋巴结,肝,脾,在无菌条件下用无菌棉球蘸取内容物接种于营养肉汤中,37℃培养18h,将有细菌生长的样品试管划线接种于SS琼脂培养基,37℃培养24h.选择具有均匀
4、典型的红色菌落接种于肉汤培养基中,37℃培养6～12h后置于冰箱中备用.5.2生化鉴定试验5.2.1细菌分离情况:在SS琼脂培养基上菌落大小约为1～2mm,呈均匀红色,表面光滑,湿润;在肉汤培养基中呈…致浑浊,管底有灰白色沉淀,染色镜检分离菌均为革兰氏阴性,中等大小,两端钝圆的球杆菌,呈单个或多个排列.5.2.2生化反应:分离到的3株菌均能分解葡萄糖,乳糖,产酸,产气,不产生硫化氢,甲基红试验呈阳性.VP试验呈阴性,吲哚试验呈阴性,枸橼酸盐试验阴性,即可确认为大收稿日期:2011-08—08作者简介:岑吉先(1977一),男,助理兽医师,主
5、要从事畜牧兽医技术推广工作.文章顺序编号:1672—5190(2011)08一O110—0l肠杆菌.5.3药敏试验将生化鉴定后确认为大肠杆菌的菌种用灭菌棉球蘸取并均匀涂于琼脂培养基中,同时贴上相应的药敏纸片,37℃下培养,分别于16h和24h观察并记录结果.5.3.1试验结果:见表1表1大肠杆菌对14种抗菌药物的药敏试验结果5.3.2讨论分析:试验结果表明.大肠杆菌对四环素耐药率达到71%,这可能与近些年来兽医临床上广泛使用该类药物有关.由于四环素类抗菌药物具有价格低廉,抗菌谱广等特点,养殖场为了提高饲料报酬,防治畜禽疾病使用较多,因此,低
6、剂量长期使用该类药物易使动物产生耐药性.硝基呋喃类药物呋喃妥因和痢特灵的敏感性很高,分别为85.7%和76%.为了保证动物源性食品的安全,维护人民健康,我国已经禁止痢特灵在所有动物食品上使用.对诺氟沙星耐药菌株达57.1%,比赵静等报道的结果(45.0%)高,耐药菌株有所增加;对环丙沙星的敏感性比诺氟沙星的高,这与试验结果相一致.对卡那霉素可产生耐药性.但产生速度较慢.与庆大霉素有单相的交叉耐药性,两者的耐药性分别为47.2%和40.9%.6科学管理与综合防控6.1饲料营养仔猪断奶1～2周内饲粮粗蛋白质水平宜控制在17%～19%,并保证有充
7、足的常量和微量元素及多种维生素(特别是硒与VE).有条件可以在饲料中添加0.5%-1%的谷氨酰胺和益生素(按厂家说明用量添加).6.2生产管理仔猪出生7d开始诱食,断奶时要少食多畜牧与饲料科学AnimalHusbandryandFeedScience犬瘟热综合诊断技术陶艳华.侯乐乐(1.江苏省吴江市震泽动物防疫站,江苏吴江215231;2.山东省青岛市畜牧兽医研究所,山东青岛266000)摘要:概述了犬瘟热的临床症状,剖检变化,细胞生物学与分子生物学诊断方法.在细胞生物学方面,对犬瘟热的诊断主要依靠病毒分离鉴定,电镜检查,包涵体检查,中和试
8、验等.随着分子生物学的发展,对犬瘟热的诊断从细胞水平发展到分子水平.国内外相继建立起CDV核酸杂交和RT—PCR诊断技术,与传统方法相比其特异性和敏感性更高.关键词:犬瘟热;诊断
