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1、单糖组分（连玉红）标准样品的配制：取葡萄糖、果糖、阿拉伯糖、木糖、核糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸10mg,加5ml水配成2mg/mL的溶液。1、多糖水解取纯化后多糖，加入5mL2mol/L的三氟乙酸（1.5mL三氟乙酸+8.5mL蒸镭水），充氮气保护，封管，于120°C下水浴5ho反应物用氮气吹干，加入2mL甲醇重新溶解，再用氮气吹干，以充分带走TFAo2、糖月青乙酰酯衍生物的制备将降解后的多糖中加入5mg盐酸轻胺，2mg肌醇，0.5ml毗卩定，振荡混匀，放入90°C水浴中加热30mino取出后冷却至室温，加入醋酸酹0.5ml,于90°C水浴屮继续
2、反应30min进行乙酰化。将反应物用氮气吹干，加入氯仿lml重新溶解，再用氮气吹干，反复进行3〜4次。最后加入2讪氯仿复溶，供气相色谱分析使用。3、气相色谱条件色谱柱：OV・225・capillarycolumn；内径：0.25mm；检测器：氢火焰离子化检测器（FID）；检测器温度：280°C；进样口温度：250°C；载气：N2（40mL/min）o以单糖标准品建立GC标准图谱为参照，根据多糖完全水解样品的岀峰时间和峰面积比可知样品的单糖组成和摩尔比。单糖组分（廖文镇）1＞水解：称取20mg的雪莲果多糖于安甑瓶中，加入4mL2mol/L三氟乙酸（TFA）,用
3、酒精喷灯对安甑瓶进行封口后置于105°C下反应6小时。反应完后，冷却至室温，将多糖水解液与适量的甲醇混合后，减压旋转蒸干，再加入适量的甲醇，减压旋转蒸干，重复5次以完全去除残留的三氟乙酸。2、衍生化：往干燥后的竹茹多糖水解物中加入0.5mL卩比噪和10mg盐酸轻胺，置于95°C下恒温震荡反应30分钟，反应完后冷却，加入0.5mL醋酸ST,于95°C下进行乙酰化反应35分钟，最终生产糖膳乙酸酯衍生物。所有的单糖标准品也按照上述步骤进行衍生化。3、色谱条件：色谱仪为DioncxICS-3000离子色谱仪，检测器为电导检测器；色谱柱为CarbopacPA20柱（2
4、X250mm）；流速为0.6mL/min,柱温为20°C,采用梯度洗脱方式:0-2min：100%200mmol/LNaOH,2.1-20min：10%20mmol/LNaOH+90%超纯水，20.1-40min：100%200mmol/LNaOHo单糖组分（葛玉）分别取多糖样品各20mg置于安甑瓶中，加入8mL2mol/L的H2SO4,使充分溶解后封管，于烘箱中120°C水解10h,冷却至室温，BaCO3中利过滤去除沉淀，上清夜减压浓缩至干，然后置于P2O5干燥器屮24h。将上述20陀多糖样品水解物、标准单糖各10mg及10mg混合标准单糖在五氧化二磷干燥
5、器中干燥24h,以0.2mLftt旋溶解，加六甲基二硅胺烷一三甲基氯硅烷(2:1)0.2mL,于60°C烘箱中放置10min,离心除去沉淀，进样。气相色谱条件是：OV・17毛细柱；FID检测器；气化温度180-220°C(6°C/min)；检测器温度300°C；进样口温度280°C；氮气为载气，流速46mL/min；进样量0.5uL单糖组分(殷君艺)称取3-5mgPLP-1于水解管中，加入2mL2mol/LTFA，真空封管后于120°C下水解2h,冷却至室温，70°C水浴下N?挥干。分别往水解液和单糖标准品屮加入10mg盐酸疑胺和0.5mL毗卩定，再加入0.
6、5mL醋酹，置于90°C水浴中反应30min,得糖月青乙酸酯衍生物，过0.45卩m有机系滤膜。GC分析条件：DB-1701石英毛细管柱(30mX0.25mmX0.25pn),FID检测器，以2为载气；2流速为30mL/min,空气流速为300mL/min,H2流速为30mL/min；检测器温度250°C,进样口温度250°C,升温程序,170°C(2min)-250°C(10°C/min),250°C下保持20min。多糖分子量测定(邵丽)采用高效体积排阻色谱(HPSEC)检测多糖的纯度及其分子量分布。以不同分子量的Dextran为标准品,重均分子量Mw分别
7、为2,500,21,400,133,800和2,000,000Da。采用WatersUltrahydrogelTMLinear(7.8X300mm,10pm)凝胶柱，2柱串联；检测器：Waters2410示差折光检测器和紫外检测器；流动相：0.1mol/LNaNC)3；流速：0.9mL/min；柱温：45°C；上样体积：20pL。多糖样品配成0.2mg/mL溶液，过0.22pm的滤膜上样分析，根据保留时间Tr,通过回归方程计算样晶的重均分子量。多糖分子量测定(廖文镇)一、色谱条件：本实验采用美国Water公司的高效凝胶渗透色谱(High-Performanc
8、eGelPermeationChromatograp
