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《一株鸽新城疫病毒的分离鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、基础研究中国畜牧兽医文摘21年012卷7第6期一株鸽新城疫病毒的分离鉴定范建华刘华雷刘学贤徐步件（.1中国农业科学院家禽研究所，扬州250；2032中国动物卫生与流行病学中心，青岛.263）602［要］从江苏省某发病鸽场分离到1病毒，经分离、鉴定为鸽新城疫。对该分离病毒进行了毒力和致病性等生物学特摘株性分析。结果，该分离病毒连续传3代后6H效价稳定在转译氨基酸与传同源性最高，与K的氨基酸组成与NRQKR疫弱毒株；2F型副粘病A一cGAT扭头、8g以上，D为196,IP为027基因核昔酸和oMT2.h
2、CI.8,F统Lst株的i26aoauat5株最低。而F因裂解位点基D强毒株的特征性结构一致（结论：（）“）1该分离病毒属于基因I型新城基因的裂解位点的特征性结构不完全决定鸽新城疫的毒力。I鸽新城疫毒力裂解位点关键鸽新城疫乂称鸽IPMV11害我国养鸽业的一个cGTGI1TAArcGTAc()［词］毒病(,PPcc翅膀下垂等为主要临发病率可高至7%。急性发病期），是冃前危为:P：5AGGCCAGYCT主要烈性传染病。发病鸽多ATc3,扩增产物经常一11日龄的青年鸽，TGYCTC见于2规方以拉绿AT32
3、：5〜50T色粪使、床表现。法连接、转化、鉴定后测序。125同源性比较和G40疾病和寄生o江苏省某规模化鸽，如果有其他细菌性进化树分析0••利用MEA.软件对所测虫病伴发,死亡率可达N3%。本实验主要针对的发病情况，及时采取病死鸽的脑、脾脏等组织进行了病毒分离和鉴定，以及相关的生物学特性研究，旨在探明该鸽场鸽病发生原因,进一步了解鸽新城疫的发病机理和寻求防控策略。序列和Gnak已公布的NVeBn±D毒株序列进行比较，根KF基因0F139tR—8n之间的核甘酸序列构建进化树和基因分型，并分析裂解位点的
4、氨基酸纽成。2结果21病毒分离、纯化结呆•病毒接种SFL胚，4以后全部出现死亡，死亡鸡胚P—0j8h胚体均表现弥漫性出血,尤以胚的头部、rai和肾脏出血严1材料与方法1I材料。I12试验鸡和鸡胚…sFP鸡胚购自山东家禽所，SFP雏鸡在重；病毒前2代细胞噬斑出现时间、大小不一，到第3以后代噬斑出现时间g4以内，大小较均匀。8h中国动物卫生与流行病学中心孵化、饲养113标准阳性血清NV、AV59DV..DIH、H和ES标准阳性22血清学鉴定结果•血清，均!勾自中国兽药监察所。病毒连续传至第3以后，HA代
5、效价稳定在在8g以上；120114试验用菌株和质粒EoiH5【GM—ay...c1D和pETEs载Hl验表明，该分离病毒的红细胞凝集性可被NV血清抑o试D抗体均由中国动物卫生与流行病学中心提供。制，AV.AV9D—6HIH5IH及ES71性血清表现阴性,初步鉴定115试验用试剂’APR试剂盒、质为新城疫病毒感染。胶纯化试剂盒ITPG、Xg1N—定结果・制剂、EoNaeL00氨节青霉素和DP均购23释度分离、纯化的病kEC...RN提取试剂盒、R一CT粒抽提试剂盒、DAN凝a、RA酶抑23病毒毒力测D
6、20、cRI和DAMrr1MT4结果取1——1—D'定—009稀白上海生.121病毒分离、噬斑纯22血清学鉴定用B-数微工生物工程技术服务鯉公司。12方法化参照文14..—1J方法进行。1量法测定尿囊液H效价，•・半A用NV、H、H、ES7标准阳性血清进行HI。D59D-6试验毒，每个稀釋度接种50龄SF只1只P鸡胚，01,照蛋3・m/1只次/d,间隔8h,共观察7d，记录鸡胚死广时间，结果详见表1。结果表明，引起鸡胚死亡的最高稀释度（D在1〜，计算得ML）0MT196oD为2・h232IP测定结杲
7、・.CI取1口龄雏鸡1只，各脑内注射1。00。稀123病毒毒力测定.D和IP测定：照《・.MTCI参中华人民共释度的纯化尿囊液001•m。另取2以同样方法注射稀释病毒5只和国出入境检验检疫行业标准》（/11202规定的标准用的生理盐水各001ST1020）N.5m。接利】后,每天在相应接种的时间观方法进行。察,记施鸡的情况,分正常（动灵活,冇动无共济失调活124引物设计、合成和基因测序根据GeBn上已发现彖）、发病（括麻痹、卧地不起，但不包括只表现迟钝••nak包表的NVFD基闪全基闪序列，利用pi
8、e5软件口行设计Trr.m0的鸡）和死亡。观察8d（结果见表2）,计算正常、发病、死引物，由上海生工生物T程技术服务有限公司合成，序列鸡的总数，根据不同的权值（常为0正、发病为1,死为2）,累计总分数，计算得IP为08°CI.72表ISF鸡胚接毒后死亡情况P?5?4中国畜牧兽医文摘21年012卷7第6期基础研究24基因测序结果.F经一步法R-CTPR,获得1条约50P0b的特异性扩增条带，与预期扩增的目的片
