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1、鼻NK/T细胞淋巴瘤中组织蛋白酶D和E【关键词】鼻肿瘤；淋巴瘤,T细胞；杀伤细胞,天然；免疫组织化学；原位杂交；组织蛋白酶D；E ExpressionsandsignificancesofcathepsinDandEselectininnasalNK/Tcelllymphoma 【Abstract】AIM:ToexploretheexpressionsandsignificancesofcathepsinD(CD)andEselectininthenephoma.METHODS:ImmunohistochemicalSPmethodphomatoexamin
2、etheexpressionsofCD45RO,CD3ε,CD20,CD79α,CD56andTIA1;InsituhybridizationforEBER1/2(EBERISH)ineEpstEinBarrvirus(EBV)infection.Asaresult,21casesofnasalNK/Tcelllymphomamunohistochemicallyinthe21casesofnasalNK/Tcelllymphomaand10casesoflymphoidhyperplasia.RESULTS:CDaofscatteredstromalhisti
3、ocytesandthepositivesignalofCDinnasalNK/Tcelllymphomauchstrongerthanthatinlymphoidhyperplasia（t=39.12,P＝0.000）.ThepositivesignalofEselectinandthemeanpositiveratesofthe2groupshadnosignificantdifferencestatistically(t=0.688,P＝0.497).CONCLUSION:ThehigherexpressionofCDinthestromaofnasalN
4、K/TcelllymphomamayrelatetothehighaggressivenessofnasalNK/Tcelllymphoma,ayhavenointimatecorrelations;lymphoma,Tcell;killercells,natural;immunohistochemistry;insituhybridization;cathepsinD;Eselectin 【摘要】目的：探讨组织蛋白酶D（CD）和E选择素(Eselectin)在鼻NK/T细胞淋巴瘤中的表达及意义.方法：采用免疫组化SP法检测41例鼻部非霍奇金恶性淋巴瘤CD45
5、RO,CD3ε,CD20,CD79α,CD56和TIA1的表达；EBER原位杂交法检测EB病毒感染情况，根据最新AbCD45RO(Dako),CD20(Dako),CD79α(Neomarkers),CD56(Neomarkers),TIA1(Counlter),Eselectin(Neomarkers)，多克隆抗体CD3ε(Neomarkers)和cathepsinD(SantaCruz).超敏SP试剂盒，购自福州迈新生物技术开发公司；液体DAB酶底物显色试剂盒，购自武汉博士德生物工程有限公司；PNARNA原位杂交检测EBV基因转录产物EBER1/2所用FIT
6、C标记的EBER1/2肽核酸探针（Y5200）和原位杂交检测试剂盒（Y5201），购自丹麦Dako公司；原位杂交专用盖玻片和二乙基焦碳酸盐（dethylpyrocarbonate,DEPC），购自美国Sigma公司. 1.2方法 1.2.1肿瘤细胞表型检测对41例鼻部非何杰金氏恶性淋巴瘤采用免疫组化SP法检测T细胞抗原CD45RO和CD3ε；B细胞抗原CD20和CD79α；NK细胞相关抗原CD56和毒性颗粒相关蛋白TIA1.CD45RO,CD20,CD79α和CD56阳性定位于细胞膜，CD3ε和TIA1阳性定位于胞浆，>20%的肿瘤细胞着色判为阳性［6
7、］. 1.2.2EBER原位杂交杂交所用器具均经1mL/LDEPC水浸泡过夜并高压灭菌处理，载玻片常规清洁、硅化后，180℃烘烤4h以去除RNA酶.组织切片常规脱蜡，蛋白酶K消化，选用FITC标记的肽核酸（PNA）探针EBER在石蜡切片上作原位杂交，桥接碱性磷酸酶标记的抗FITC抗体，以NBT/BCIP为碱性磷酸酶的底物检测杂交信号，显色后，3mmol/L核固红衬染.20%以上细胞阳性着色诊断为ISH阳性.用已知EBERISH阳性的淋巴结非霍奇金恶性淋巴瘤石蜡包埋组织作阳性对照，DEPC水代替含探针的杂交液作阴性对照. 1.2.3鼻NK/T细胞淋巴瘤诊断标准
8、［7］病理改变为瘤细胞血
