肝癌组织中1433σ启动子异常甲基化及基因转录水平检测的论文

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1、肝癌组织中1433σ启动子异常甲基化及基因转录水平检测的论文【摘要】目的探讨肝癌1433σ基因启动子异常甲基化状况及其与转录水平的关系。方法1433σ启动子甲基化用甲基化特异性pcr检测；1433σmrna的表达水平用实时定量pcr检测。结果1433σ启动子甲基化在肝癌患者癌旁组织、肝硬化组织和癌组织中的阳性率分别为6.8%(3/44)、56.1％（23／44）和93.2%(41/44)。不同性别、分化程度和乙型肝炎病毒状态的组织中1433σ甲基化频率无显著差异（p>0.05）；发生甲基化的组织标本中90.6%(58/64

2、)转录缺失，10.4%转录水平下降，而未发生甲基化的标本1433σmrna表达水平基本正常。1433σ甲基化与其mrna水平明显负相关（p<0.05）。1433σ甲基化与其mrna表达水平下降密切相关（p<0.05）。结论从癌旁组织、肝硬化组织到癌组织，1433σ基因启动子甲基化频率逐步升高，且与其mrna表达相关，提示1433σ启动子甲基化可能在肝癌形成过程中是一个早期事件，与肝癌发生有一定关系。【关键词】肝癌；1433σ；启动子；甲基化；表达detectionofpromoterhypermethylationa

3、ndmrnaexpressionof1433σgeneintissuesofhumanhepatocellularcarcinomalihaiping,zhangjicai,fengjing,yuzongtao,lvjuntaihehospitalaffiliatedofyunyangmedicalcollege，shiyan442000,chinacorrespondingauthor:zhangjicai,email:adamzhang418@yahoo.abstract：objectivetoinvestigatepromoterm

4、ethylationstatus,mrnaexpressionof1433σgeneandtheirrelationshipinhepatocellularcarcinoma(hcc).methodsthemethylationstatusofthe1433σgeneintissuesethylationspecificpcr.the1433σmrnaexpressioninedbyrealtimepcr.resultshypermethylationofcpgislandsofthe1433σgenernaexpressionof

5、1433σintissuesethylatedproductapproximatedtothenormallevel,plesethylatedproductit,10.4%allevel.theexpressionandmethylationof1433σethylationplaysacausalroleininactivationofthe1433σgeneinhcc.hypermethylationandtheresultinglossofexpressionofthe1433σgenecorrespondstooneofthe

6、mostmonabnormalitiesreportedtodateinhcc,suggestingtheircrucialroleinthedevelopmentofhcc.keya;1433σ;promoter;methylation;expression1433σ抑癌基因定位于1p35，负责g2细胞周期检查点的调控，在dna损伤修复中起重要作用。.在原发性膀胱癌、肠癌和乳腺癌中其蛋白的表达明显下调。随着表现遗传学研究的深入，发现基因启动子区甲基化是1433σ基因表达失活的主要机制之一,但在肝癌中的情况少见报道。本研究用甲基化特异性pc

7、r（methylationspecificpcr,msp）检测肝癌组织中1433σ基因启动子区甲基化状况，用sybrgreeni实时定量pcr检测1433σmrna在肝癌中的转录水平，进而探讨1433σ基因甲基化与其转录的关系，以及1433σ基因启动子甲基化在肝癌形成过程中的作用。1资料与方法1.1资料1.1.1资料来源44例肝癌患者均来自郧阳医学院附属太和医院的2002年3月～2005年12月住院患者，男35例，女9例，平均年龄50岁（37～67岁），经病理学诊断确诊。术后取癌组织、肝硬化组织和癌旁组织。1.1.2主要试剂与仪器a3

8、500、trizolreagent(promega)；pcr试剂（华美公司）；sybrgree