银杏叶提取物对大鼠肝硬化的治疗作用及其机制研究

《银杏叶提取物对大鼠肝硬化的治疗作用及其机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、银杏叶提取物对大鼠肝硬化的治疗作用及其机制研究高山郑州大学第三附属医院药剂科（郑州450052）目的研究银杏叶提取物（extractofginkgobiloba,EGb）对大鼠肝硬化的影响并探讨其机制。方法用四氯化碳加高脂饮食法造成大鼠肝硬化模型，银杏叶片以20mg/kg、15mg/kg、10mg/kg的量给药30天，测定血清总蛋白（T-P）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、血清透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）和III型前胶原（PCIII）的含量，计算白蛋白与球蛋白的比例（A/G）。

2、TUNEL测肝细胞凋亡指数。结果与模型组相比，银杏叶提取物各组能显著降低ALT、AST、TBIL含量，增加白蛋白含量，提高白/球比例，显著降低血清HA、LN和PCIII水平；显著降低细胞凋亡指数。并具有剂量依赖性。结论银杏叶提取物对大鼠肝硬化•有保护作用，其机制可能是通过抗肝细胞凋亡来实现的。【关键词】银杏叶提取物肝硬化肝细胞细胞凋亡［］R931.74［］A［］1810-5734（2009）03-0004-03银杏树叶的提取物（extractofginkgobiloba,EGb）具有扩张血管，调节血脂，抑制血栓形成；改善记忆；清除自由基

3、等多种药理作用。临床用于治疗心脑血管方面的疾病和癌症。己发现银杏叶提取物对肝纤维化、肝癌等具有一定的治疗作用［1-6］,临床上已有银杏叶提取物成功用于治疗失代偿期肝硬化的例子，木文主要研究银杏叶提取物一一银杏叶片（每片含总黄酮醇苷9.6mg,萜类内脂2.4mg）对大鼠肝硬化的作用，并进行初步的机制探讨。1材料与方法1.1试验材料：实验动物：60只SD大鼠，体重180-220g，购自河南省实验动物中心。动物合格证号：SCXK（豫）2005-0001,动物房温度为25±2°C，标准大鼠颗粒饲料饲养，自由饮水。银杏叶片，扬子江药

4、业集团生产，批号08011301。使用吋用0.5%的CMC-Na混悬，配成不同浓度。1.2主要试剂及仪器：四氯化碳（CCI4）：郑州化学试剂二厂；竣甲基纤维素钠（CMC-Na）：上海浦东化学品有限公司，批号:20071026；透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）、III型前胶原（PCIII）放免试剂盒均购自北京北方免疫试剂研究所；苏它试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。BT2000全自动生化分析仪，意大利Vialicenza,Roneool56cTUNEL试剂盒，购自北京中杉金桥生物技术有限公司。1.3模型制备：60只大鼠适应性饲养1周，

5、随机分为造模组50只和正常组10只。采用复合造模方法复制大鼠肝硬化模型[7]，每周2次皮下注射四氯化碳，0.3ml/100g体重，共10周。造模开始第1-2周均以20%猪油、0.5%眼固醇、79.5%玉米面混合饲料喂养，第3-9周以0.5%胆固醇和99.5%玉米面混合饲料喂养。整个造模期间以30%乙醇作为饮料让大鼠自由饮用。正常组则以正常饲料和纯净水喂养。造模过程中死亡3只。实验10周末造模组随机抽取3只经肝组织病理切片确认造模成功后予以分组治疗。将造模成功的44只大鼠随机分为4组，每组11只，即模型组、EGb高、中、低剂量组，分别灌胃

6、给予0.5%的CMC-Na及20mg/kg、15mg/kg、10mg/kg的EGb。给药30天，给药过程中模型组死亡一只。给药结束后，大鼠禁食14小时，戊巴比妥钠麻醉，腹主动脉取血后处死动物，取肝脏。离心分离血清，全自动生化分析仪测定血清总蛋白（T-P）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）含量，计算白蛋白/球蛋白（A/G）比例;放免法测定血清中HA、LN、PCIII含量。肝细胞凋亡原位检测按照试剂盒说明书操作进行，凡满足下列条件之一者即确定为凋亡肝细胞：（1）出现凋亡小体；（2）核呈新月形

7、；（3）核浓缩。每张切片选择5个具有代表性的高倍视野（400×）,共计数500个肝细胞，取阳性细胞平均百分率作为凋亡指数（Apoptosisindex,AI）,即：凋亡指数=（5个高倍视野内阳性肝细胞数之和/500）×100%。1.4统计学处理：所有数值以&plUSmn;S,利用SPSS11.0软件进行单因素方差分析、两两比较及相关性分析，p<0.05具有显著性差异，p<0.01具有极显著性差异。2结果2.1银杏叶片对肝硬化大鼠血清中ALT、AST、TBIL的影响：肝硬化模型建立后，肝细胞受损，细胞中

8、的酶释放进入血液中，导致血清中ALT、AST含量明显升高；同吋，肝功能受损时，胆红素不能与葡萄糖醛酸结合进入胆汁而在血液中蓄积，引起血液中总胆红素水平升高。经EGb干预后，与模型组相比，银杏叶提取物高中低剂