agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程

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1、Agilent1290超高效液相色谱仪标准操作规程Ⅰ目的：制定Agilent1290超高效液相色谱仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液相色谱仪。Ⅱ范围：适用于Agilent1290超高效液相色谱仪的使用。Ⅲ规程：1开机1.1打开计算机，进入Windows画面。1.2打开1290INFINITYHPLC各模块电源。1.3待各模块自检完成后，双击“Instrument1Online”图标，化学工作站自动与12001290INFINITYHPLC通讯。1.4从“View”菜单中选择“方法和运行控制”

2、画面，点击”视图”菜单中的“样品视图“系统视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。1.5点击泵下面的瓶图标，选择‘瓶填充‘如下图所示，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。点击“Ok”。1.6从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口1”，然后点击“改变…”钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。(如同时检测二个信号，则重复选中“信号窗口2”)2排气2.1首先在方法编辑中，泵的参数设置部分，选好需要排空的通道（保证是开的）2.2点击仪器状态视图中泵的图标，选择控制，

3、出现如下图2.3勾上吹扫，并且输入流速，时间，比例就可以purge泵头。排空的时候阀会自动切换，无需人为介入。2.4当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候，选择预备---开。然后点击确定。此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体，并持续20次自动停止。3编辑数据采集方法3.1开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示选中除“数据分析”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。3.2方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：Thisisfortest!）。点击“确定”，进入下一画面。3.

4、3进样方式选择根据自动进样器的类型，选择合适的进样方式。3.4泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1.5ml/min，停止时间：10min。在“溶剂B”处输入70.0，(A=100-B)，也可“插入”一行“时间表”，编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。3.5自动进样器参数设定:选择合适的进样方式，如图所示，进样体积1.0ul，标准进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在针座旁边中洗针。3.6柱

5、温箱参数设定:在“温度”下面的空白方框内输入所需温度，如：40度。并选中它，点击“更多信息>>”键，如图所示，选中“与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。3.7DAD检测器参数设定:检测波长:254nm，带宽=4nm，参比波长=360nm，带宽=100nm;检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽：一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。峰宽（响应时间）：其值尽可能接近要测的窄峰

6、峰宽。狭缝-狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。可以开启光学单元温度控制;可以设定8通道信号等。3.8FLD检测器参数设定:色谱条件：响应时间=4s.停止时间：4min。激发波长:200-700nm，步长为1nm，或零级。发射波长:280-900nm，步长为1nm，或零级。PMT:多数应用适当的设定值为10，若高浓度样品峰被切平头，则减少PMT值。“峰宽”：大多数应用设为4s，只有快速分析采用小的设定值。多波长及光谱（激发）。多波长及光谱（发射）

7、。同时可以输入范围、步长、采集光谱。点击“确定”进入下一画面。3.9运行时选项表在“运行时选项表”中，选中“数据采集”，点击“确定”。3.10保存方法从“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定。4单次样品运行从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，如下图所示，输入操作者名称，如“安装工程师”；在“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”。点击“确定”，从“系统视图菜单启动系统。等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”，进样。(若无自动样器，则基线

8、平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。)5面积百分比数据处理5.1选择界面从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。5.2调用信号从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名，如下图所示。点击“确定”，则数据被调出。5.3做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”，如下图所示。从“范围”中选择“满量程”或“自动量程”及合适的时间范围或选择“自定义量程”调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“确定”。5.4积分优化:从