蛙心灌流实验报告.pdf

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1、实验二离体蛙心灌流实验专业：学号：姓名：一、实验目的1.学习离体器官（蛙心）灌流的方法。2.观察理化因素对蛙心活动的影响。二、实验原理蛙心的灌流:蛙心无营养性血管，离体之后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间，心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。心肌：受体受体激动剂效应β1肾上腺素心率增快、房室传导去甲肾上腺素加速、心肌收缩力加强。M乙酰胆碱心率减慢、房室传导减慢、心肌收缩力减弱。1.任氏液：正常对照含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、Na2HPO4和蒸馏水，其电解质、晶体

2、渗透压、pH值与蛙的组织液相近。2.0.65%NaCl灌流：3.2%CaCl2灌流：4.1%KCl灌流：5.1:10000E灌流6.1:10000Ach灌流7.心得安β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用。8.阿托品M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。三、实验器材离体蛙心任氏液、l％KCl溶液、2％CaC12溶液、0.65%NaCl溶液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、心得安、阿托品四、实验步骤1.离子试剂任氏液清洗任氏液清洗任氏剂0.65%NaCl2%CaCl21%KCl任氏液

3、2.药物试剂任氏液清洗任氏液清洗任氏液清洗E心得安+EAch阿托品+Ach任氏液五、结果与分析心率：34次/min最大收缩力：2.5g最小收缩力：1.1g图1正常脉搏曲线心率：35次/min最大收缩力：1.6g最小收缩力：1.1g图20.65%NaCl灌流脉搏曲线2+2+2+分析：细胞外液中Ca浓度降低，2期Ca内流减少，胞浆中Ca减少，心肌收缩力降低。心率：38次/min最大收缩力：3.5g最小收缩力：1.1g图32%CaCl2灌流脉搏曲线分析：心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关。心肌肌浆网不发+2+达，储钙能力差，易受细胞外钙

4、离子浓度高低影响。细胞外液中Na与Ca有竞2+2+争性抑制，细胞外液Ca浓度升高，细胞兴奋时内流Ca增加，心肌收缩力增强。慢反应细胞4期去极速度加快，心率增快。心率：21次/min最大收缩力：3.4g最小收缩力：1.1g图41%KCl灌流脉搏曲线+2+++分析：K与Ca在细胞膜上有竞争性抑制，细胞外液中K浓度升高，K抑制细胞2+2+膜对Ca转运，因此进入细胞内Ca降低，心肌的兴奋—收缩耦联作用减小，心肌收缩力减弱。心率：35次/min最大收缩力：3.5g最小收缩力：0.9g图5肾上腺素灌流脉搏曲线2+分析：肾上腺素与心肌细胞膜上的β1受体结合，

5、心肌细胞和肌浆网膜Ca通透2+性增强，肌浆中Ca浓度升高，心肌收缩力增强。而且肾上腺素使肌钙蛋白与钙离子亲和力下降，肌钙蛋白对钙离子的释放增强，肌浆网膜摄取钙离子的速度加快，钠-钙离子的交换增加，复极期向细胞外排出钙离子增多，心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显加强。心率：34次/min最大收缩力：2.5g最小收缩力：1.1g图6心得安+E灌流脉搏曲线分析：心得安是β1受体阻断剂，能够抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用，因此心率及心肌收缩力保持不变。心率：33次/min最大收缩力：2.5g最小收缩力:1.1g图7乙酰胆碱灌流脉搏曲线+分

6、析：乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，心肌细胞膜K通道的通透性增强，+2+促进K外流，动作电位期间Ca内流减少，心肌收缩力降低。同时乙酰胆碱可直2+2+接抑制Ca通道，导致Ca内流减少，心肌收缩力降低。心率：34次/min最大收缩力：2.5g最小收缩力：1.1g图8阿托品+Ach灌流脉搏曲线分析：阿托品是M受体阻断剂，能够抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力，因此心率及心肌收缩力保持不变。六、讨论1.为何常用离体蛙心，而不常用离体哺乳类动物心脏做心脏灌流实验？蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处，它的离体组织、器

7、官的生活条件比较简单，易于控制和掌握，来源丰富且价格低廉。离体蛙心不需要恒温和特殊的供氧设备，因此常被选作心脏灌流实验。而哺乳类心脏生活条件要求高，离体心脏灌流需要恒温环境，恒压或恒流灌流、供氧。实验影响因素多、设备多，心脏离体后存活时间较短。因此一般学生实验较少用哺乳类动物心脏做离体心脏灌流实验。2.离体蛙心为什么会节律性跳动？把离体和脱离神经支配、体液因素影响的动物心脏保持在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动，这是由于心脏的静脉窦能自动按一定的兴奋节律产生兴奋，并传导到心房和心室，引起整个心脏又节律的兴奋和收缩。静脉窦能

8、产生节律性兴奋是由于其自律细胞在复极完毕后，立即开始自动的缓慢的去极化，使膜电位逐渐减小，当达到阈电位水平时，便爆发动作电位。3.蛙心插管插入心室时，