营养要求微生物的营养类型营养物质进入细胞培养基纯培养的.ppt

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1、营养要求微生物的营养类型营养物质进入细胞培养基纯培养的分离内容提要:微生物细胞的化学组成1.化学元素组成：主要元素：C、H、O、N、P、S、K、Mg、Ca、Fe等微量元素：Zn、Mn、Na、Cl、Cu等2.组成成分分析：有机物、无机物、水内容:营养要求二、营养物质及其生理功能1.碳源：能提供微生物营养所需的碳元素的物质2.氮源：为微生物提供氮素来源的物质3.能源：为微生物生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能4.无机盐：为微生物提供碳素和氮素以外的各种重要元素的物质5.生长因子：微生物正常代谢必不可少的自身不能合成或合成量不足满足机体生长需要的有机物6.水：微生物生长必不可少

2、的物质三、微生物的营养类型根据碳源、能源和电子供氢体的不同进行分别分类：微生物的营养类型微生物的营养缺陷型与原养型缺陷型：某些菌株发生突变后，失去合成某种对该菌株生长必不可少的物质的能力，必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖，这种突变型称为营养缺陷型。相应的野生型称为原养型。如何鉴别某一菌株的缺陷型？以赖氨酸缺陷型为例说明。第二节培养基1.什么是培养基？培养基：人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。要求：必须具备微生物所需的六大营养要素。2.选用和配制营养基的原则目的明确：为什么配制该培养基？作何用途？营养协调：选择适宜的营养物质和配比条件适宜：物理化学条件，

3、主要是酸碱度和渗透压经济节约：生产的效益实验室科学研究：适当忽略成本企业大规模生产：尽量经济做种子培养基：营养成分丰富些，氮源含量高些做发酵培养基：氮源含量相对低些一般培养用：天然培养基的要求精细研究：组合培养基的要求培养的微生物对象针对不同的微生物配制不同成分、浓度和比例的培养基。确定培养基中营养要素数量和比例的依据：培养对象的不同成分和元素的组成培养对象的营养类型，在异养微生物中，碳源兼作能源，而能源需要量很高。培养基中营养物质的浓度适宜微生物才能良好生长。碳氮比：培养基中碳元素和氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖和粗蛋白的比值。该值在发酵工业中十分重要，可决定菌

4、种的生长或是产物的积累。大多数化能异养菌的培养基中各营养要素量的比例规律：要素：水>碳+能源>氮源>磷、硫>钾、镁>生长因子含量：10-110-210-310-410-510-6酸碱度的调节方法：磷酸缓冲液：调节磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的浓度比可获得PH6.0-7.6的一系列稳定PH。碳酸钙备碱法：碳酸钙在培养基中可逐渐被溶解掉，从而改变酸碱度。内源调节按实际需要不间断向培养基中加酸液或碱液。外源调节渗透压和水活度：微生物各有一套适应渗透压的方法，一定的适宜渗透压，即等渗溶液。高渗溶液和低渗溶液。水活度：天然环境中微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。以粗代精：粗和精的概念是认

5、为划分的以野代家：野生原料代替栽培原料以废代好：利用工农业生产中可利用的废弃物以简代繁：改进培养基时，可用减法原则代替加法原则以烃代粮：以石油或天然气代替糖质原料以纤代糖：以纤维素代替糖类原料以氮代朊：以非蛋白质和非氨基酸原料代替有机的氮源以国代进：以国产原料代替进口原料培养基的配制原则3.设计培养基的方法生态模拟查阅文献精心设计实验比较：定性到定量，由小到大的原则包括：小试，中试，大试，试验型发酵二、培养基的种类天然培养基根据成分来分：组合培养基半组合培养基固体培养基根据物理状态来分：液体培养基半固体培养基基础培养基根据功能来分：加富培养基选择培养基鉴别培养基天然培养基：含有

6、化学成分不清楚或含量不恒定的有机物的培养基，也叫非化学限定培养基。例如牛肉膏蛋白胨培养基，麦芽汁培养基。常用的天然有机物有：牛肉侵膏，蛋白胨，豆芽汁，玉米粉，土壤浸液，牛奶，血清，麸皮等。组合培养基：由化学成分完全清楚的的物质配制而成的培养基，也叫合成培养基、化学限定培养基。例如培养放线菌用的淀粉硝酸盐培养基（高氏一号培养基），培养真菌的葡萄糖铵盐培养基（查氏培养基）。参与配制的物质是高纯度的化学试剂。半组合培养基：既含有天然成分又含有纯化学试剂的培养基。例如培养真菌所用的马铃薯蔗糖培养基。培养基中凝固剂的有无和含量决定培养基的物理状态。固体培养基：液体培养基中加入凝固剂外观呈

7、现固态的培养基。主要的凝固剂有琼脂、明胶、硅胶。凝固培养基（1-2%琼脂或5-12%明胶）；非可逆性凝固培养基（血清凝固或加入硅胶）；天然固体培养基（米糠、木屑，马铃薯块等）；滤膜（醋酸纤维薄膜浸于液体培养基中）用途：菌种分离、鉴定、计数、保藏、选种、育种、抗生素测定等。半固体培养基：凝固剂含量少于固体培养基，呈现出容器倒置不致流下，剧烈震荡会破散的状态，约含0.2-0.7%琼脂，一般含0.5%。用于细菌的动力观察，微生物趋向性研究等。液体培养基：不加任何凝固剂，培养基呈现液态。主要用于大工