植物源农产品中叶黄素、玉米黄质、β-隐黄质的测定 高效液相色谱法-标准文本.doc

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1、ICS 点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号备案号：  中华人民共和国农业行业标准XX/TXXXXX—XXXX     植物源农产品中叶黄素、玉米黄质、β-隐黄质的测定高效液相色谱法Determinationoflutein,zeaxanthinandβ-cryptoxanthininagriculturalproductsofplant-basedfoodsbyHPLC点击此处添加与国际标准一致性程度的标识         -XX-XX发布XXXX-XX-XX实施        发布XX/TXXXXX—XXXX前  言本标准按照GB/T1.1-2020给出的规划起

2、草。本标准由中华人民共和国农业农村部提出。本标准由农业农村部农业农村部农产品营养标准专家委员会归口。本标准起草单位：农业农村部食物与营养发展研究所，北京市营养源研究所，内蒙古蒙牛乳业集团有限公司，中国合格评定认可委员会，食品行业生产力促进中心，北京市理化分析测试中心，北京市农林科学院蔬菜研究中心。本标准主要起草人：崔亚娟，朱大洲，孔凡华，白沙沙，许洪高，屠振华，梁克红，杨春雪，刘玉峰，李东，赵欣，马文丽，宋晓东，杨志刚，李宏，马杰，贾丽，刘光敏，王亚钦。6XX/TXXXXX—XXXX植物源农产品中叶黄素、玉米黄质和β-隐黄质的测定高效液相色谱法1　范围本标准规定了植物源农产品中叶

3、黄素、玉米黄质和β-隐黄质的高效液相色谱测定方法。本标准适用于植物源农产品中叶黄素、玉米黄质和β-隐黄质的测定。本标准叶黄素、玉米黄质检出限为1.5μg/100g，定量限为5μg/100g；β-隐黄质检出限为1μg/100g，定量限为3μg/100g。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3　原理试样中的叶黄素、玉米黄质和β-隐黄质经皂化、提取、浓缩后，C30反向液相色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定

4、量。4　试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1　试剂4.1.1无水乙醇（C2H5OH）。4.1.2无水硫酸钠（Na2SO4）。4.1.3氢氧化钾（KOH）。4.1.42,6-二叔丁基对甲酚（C15H24O）：简称BHT。4.1.5环己烷（C6H12）。4.1.6无水乙醚（C4H10O）。4.1.7正己烷（C6H14）。4.1.8pH试纸（pH范围1~14）。4.1.9甲醇（CH3OH）：色谱纯。4.1.10甲基叔丁基醚（C5H12O）：色谱纯。4.1.11乙腈（C2H3N）：色谱纯。4.1.12叶黄素标准品，CAS号127-40

5、-2，纯度≥97.0%。6XX/TXXXXX—XXXX4.1.13玉米黄质标准品，CAS号144-68-3，纯度≥95.0%。4.1.14β-隐黄质标准品，CAS号472-70-8，纯度≥97.0%。4.2试剂配制4.2.130%氢氧化钾水溶液：称取30g氢氧化钾（4.1.3），加水溶解稀释至100mL。4.2.2萃取溶剂：称取1gBHT（4.1.4），以200mL环己烷（4.1.5）溶解，加入400mL无水乙醚（4.1.6）和400mL正己烷（4.1.7），混匀。4.2.30.1%BHT乙醇溶液：称取0.1gBHT（4.1.4），以100mL无水乙醇（4.1.1）溶解，混匀。4

6、.3标准溶液配制4.3.1标准储备液（40μg/mL）：分别称取1.00mg叶黄素、玉米黄质、β-隐黄质标准品于25mL棕色容量瓶中，用0.1%BHT乙醇溶液（4.2.3）溶解并定容至刻度。该标准储备液充氮避光置于-18℃或以下的冰箱中可保存三个月。注：叶黄素、玉米黄质、β-隐黄质标准储备液使用前需校正，具体操作见附录A。4.3.2标准工作液：从叶黄素、玉米黄质、β-隐黄质标准贮备液中准确移取0.05mL、0.10mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL溶液入5个10mL棕色容量瓶中，用0.1%BHT乙醇溶液（4.2.3）定容至刻度，得到浓度为0.20μg/m

7、L、0.40μg/mL、0.80μg/mL、2.00μg/mL、4.00μg/mL、8.00μg/mL的系列标准工作液，标准工作液现用现配。5仪器与设备5.1天平：感量0.01mg和0.1mg。5.2紫外可见分光光度计。5.3液相色谱仪，带二极管阵列检测器或紫外检测器。5.4振荡器。5.5旋转蒸发仪。5.6恒温水浴摇床。5.7氮吹仪。6分析步骤注：由于叶黄素、玉米黄质、β-隐黄质对光敏感，除非另行说明，所有试验操作应在无500nm以下紫外光的黄色光源或红色光源或暗室环境中进行。6