实验八 酵母菌形态及细胞结构的观察.doc

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1、实验八酵母菌形态及细胞结构的观察生物112周泓兆一、目的1.观察酵母菌的出芽生殖方式；2.观察酵母菌的细胞形态、主要细胞器及假菌丝形态；3.学习并掌握区分酵母菌死活细胞的染色方法；4.观察酵母菌的子囊及子囊孢子形态。二、原理酵母菌分属于子囊菌门和担子菌门，一些菌株未发现有性生殖。酵母菌通常是多形态、不运动的单细胞微生物，很多酵母细胞在一定条件下，芽殖后不脱落而形成假菌丝。它们的菌落形态类似于细菌，但体积较大。其细胞内部结构清晰，可通过不同的染色方法在高倍镜下进行区分，如中性红是液泡的活体染色剂，可将其染成红色；脂肪滴可被苏丹黑氧化而呈蓝黑色；肝糖粒可被碘液氧化而

2、呈深红褐色。无性生殖有芽殖和裂殖两种，芽殖又有单出、双出和多出之分。酵母菌的有性生殖一般能形成4-8个子囊孢子。酵母菌的死活细胞可通过美蓝染色加以区分。美蓝（又称亚甲基蓝）是一种无毒性染色剂，其氧化型为蓝色，还原型为无色。由于活细胞具有较强的还原能力，可使美蓝由蓝色的氧化型转变为无色的还原型。处于代谢旺盛的细胞还原美蓝染料的能力强，细胞为无色，而代谢缓慢的老细胞和死细胞为浅蓝色或深蓝色。三、材料1.菌种：酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae）热带假丝酵母（Candidatropicalis）2.染料：0.1%美蓝染液3.培养基：葡萄糖醋酸盐培

3、养基、马铃薯葡萄糖培养基4.其它：无菌盖玻片，无菌镊子，载玻片，盖玻片，无菌水，洗瓶，二甲苯，擦镜纸，吸水纸，接种环，酒精灯。四、实验步骤1.酿酒酵母的形态观察：（1）取一个干净载玻片，在中央低一滴美蓝染液。（2）用接种环取少量酿酒酵母菌苔在染液中涂匀。（3）用镊子取一盖玻片，以45°角与菌悬液接触后，轻轻盖在菌悬液上，避免产生气泡，然后用吸水纸吸干多余液体。（4）置于高倍镜下观察。观察芽殖和死、活细胞的颜色。30min后，再次观察死、活细胞数是否发生了变化。2.假菌丝的观察：（1）用解剖刀将盖玻片及其下面与盖玻片面积差不多的培养基取出，置于一个干净载玻片上（盖

4、玻片朝上）（2）置于高倍镜下观察。观察假菌丝的形态特征。一、结果与讨论1.本次实验非常简单，可在低倍镜下确定大概观察区域后调至高倍镜观察。2.制作水压片的时候需要尽量减少美蓝染液的滴加量，防止过多染液溢出。3.制作水压片时挑取少量菌即可，避免菌体数量过多导致难以观察。4.观察假菌丝时，可以观察菌苔边缘，假菌丝较多。