姜黄素对hepa 1-6肝癌细胞凋亡及ros影响（

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1、姜黄素对Hepa1-6肝癌细胞凋亡及ROS影响*基金资助：上海市基础研究重点项目（09JC1413600）；龙华医院国家中医临床研究基地“龙医团队、龙医学者”项目（LYTD-04）。杜琴，邓珊，沈克平，胡兵**通讯作者：胡兵（1971-），男，博士，副研究员，硕士生导师。研究方向：肿瘤生物学、功能基因组与抗癌中药作用及配伍．E-mail:beearhu@hotmail.com*（上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科，中医肿瘤研究所，上海20032）摘要目的：观察姜黄素对小鼠肝癌Hepa1-6细胞凋亡及活性氧(Reactiveoxygenspe

2、cies，ROS)水平的影响。方法：不同浓度姜黄素处理Hepa1-6肝癌细胞，MTT比色法检测细胞增殖，Hoechst33258染色检测细胞凋亡形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡，WesternBlot法检测活化型caspase-3，2-7-二氯氢化荧光素乙二脂（DCFH-DA）染色法结合荧光酶标仪检测姜黄素对胞内ROS产生的影响利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测。结果：2～40μmol/L姜黄素作用24h、48h均可抑制肝癌Hepa1-6细胞增殖，并呈现

3、一定的时间与剂量依赖性。5～20μmol/L姜黄素作用48h后Hepa1-6细胞呈现凋亡形态变化，细胞凋亡率呈一定程度剂量依赖性，同时可检测到活化型caspase-3、以及ROS产生。结论：姜黄素可以抑制Hepa1-6细胞增殖，促使Hepa1-6细胞凋亡，可能与活化caspase-3及提高细胞内ROS水平相关。关键词肝癌；姜黄素；细胞凋亡；caspase-3；ROSEffectsofCurcuminonROSproductionandapoptosisinMurineHepatocarcinomaHepa1-6CellsDuQin,Den

4、gShan,ShenKeping,HuBing（DepartmentofOncologyandInstituteofTraditionalChineseMedicineinOncology,LonghuaHospital,ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai,20032）Objective：Toobservetheeffectsofcurcuminonapoptosisandreactiveoxygenspecies(ROS)productioninmurinehe

5、patocarcinomaHepa1-6cellsinvitro.Methods：Hepa1-6cellsweretreatedwithdifferentdoseofcurcumin.CellproliferationwasdetectedwithMTTassay.Apoptoticmorphologywasvisualizedbyhoechst33258staining.Cellapoptosiswasdetectedbyflowcytometryanalysis.Caspase-3wasdetectedbywesternblot.In

6、tracellularROSproductionwasdetectedby2’,7’-dichlorofluorescindiacetate(DCFH-DA)staining.Results：Comparedwiththecontrols,upontreatmentwith2~40μmol/Lofcurcuminfor24hto48h,Hepa1-6cellsproliferationwassignificantlyinhibitedinatimeanddosedependentmanner.5~20μmol/Lofcurcuminals

7、oinducedapoptosisandapoptoticmorphologychangeinHepa1-6cells.Aftertreatmentwith5~20μmol/Lcurcumin,caspase-3wasactivatedaccompaniedbygenerationofROS.Conclusion：Curcuminmayinhibitcellproliferation,induceapoptosisinmurinehepatocarcinomaHepa1-6cells,andmayinvolvementofcaspase-

8、3activationandROSproduction.KeyWordsHepatocarcinoma;Curcumin;Apoptosis;Caspases-3;Reactiveoxygen