病原微生物实验考试总结.pdf

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1、【培养基】名称试剂特点单糖发酵培养1%溴甲酚紫+葡萄糖、基乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖双糖铁培养基酚磺酞（酚红）+乳糖、分解葡萄糖：培养基底部变黄葡萄糖+亚铁离子分解乳糖：培养基斜面变黄分解含硫氨基酸：产生H2S，生成黑色沉淀S-S琼脂培养基乳糖、胆盐（抑制杂（大肠埃希菌）发酵乳糖产酸沉淀胆盐+中菌）、枸盐酸钠（抑制杂性红=红色乳浊状沉淀菌）、枸盐酸铁（Fe2+）、（变形杆菌、沙门菌）分解含硫氨基酸，中性红水溶液菌落黑色【填空】真菌培养（条件、培养基）：三高三低：高糖、高湿度、高氧；低营养、低温、低ph。真菌培养基：沙保弱培

2、养基真菌三种类型的菌落：酵母型菌落、类酵母型菌落、丝状菌落细菌在液体培养基中可呈现的生长方式（3）：均匀浑浊，絮状沉淀，菌膜生长（或腐败性恶臭）。半固体培养基两种生长状态：穿刺线两侧羽毛状生长，为动力阳性。无鞭毛菌沿穿刺线线状生长，为动力试验阴性。观察细菌的计量单位为μm，油镜观察，1000倍革兰染色可观察细菌的：大小，形态，排列，染色性。细菌分类：球菌、杆菌、螺旋菌细菌的几种特殊结构：荚膜、鞭毛、芽孢。常见的细菌变异现象：L型变异；菌落变异；鞭毛变异；耐药性变异S-R变异（中文名称、原理）：菌落变异。菌落有光滑（S）型和

3、粗糙（R）型两种。S型菌落表面光滑湿润、边缘整齐；细菌经人工培养多次传代后，菌落表面粗糙干燥、边缘不整齐。由光滑型变为粗糙型，称为S-R变异。H-O变异（中文名称、原理）：鞭毛变异。有周鞭毛的变形杆菌，普通琼脂培养基上具有迁徙生长的现象，菌落形似薄膜，为H菌落；若将此菌点种在0.1%苯酚的培养基上，鞭毛形成收到抑制，不再出现迁徙现象，在点种处形成不向外扩展的单个菌落，为O菌落。失去鞭毛的变异为H-O变异。血凝试验：流感病毒表面具有血凝刺突，其成分为糖蛋白，能与某些动物或人红细胞表面的糖蛋白受体结合，出现红细胞凝集的现象。血

4、凝效价：血凝试验中‘++’表示有半数鸡红细胞凝集，在管低铺成薄膜，不凝集的红细胞在管底中心形成小圆点。以出现‘++’的病毒液的最高稀释度为~平板划线原理：在划线过程中，线上的微生物越来越少，进而达到分离的目的，经培养后可获得由单个细胞生长而成的菌落。鞭毛观察（3）：电镜观察，鞭毛染色后光镜下观察，半固体接种（或悬滴观察活菌运动）。最重要的消毒方法：高压蒸汽灭菌，可达121度，维持15'-30'小白鼠拖腿实验常用于鉴定破伤风梭菌的破伤风痉挛毒素H2S生成实验：判断细菌分解含硫氨基酸的能力，培养基中出现黑色的硫化铅或硫化亚铁沉

5、淀白喉棒状杆菌：阿伯特（Alert）染色法，异染颗粒。病毒三个培养方法：动物接种，鸡胚培养，组织细胞培养。紫外线灭菌（原理、特点、用于何种灭菌）：使DNA链上两个相邻的胸腺嘧啶以共价键结合，形成二聚体，干扰DNA复制转录。穿透力弱，对人体皮肤眼睛有损伤。空气消毒，不耐热物品表面消毒。实验菌对抗菌药物敏感程度：抑菌圈的直径大小。【单菌】结核分枝杆菌（培养基、菌落特点）：营养丰富的培养基。常用的有罗氏固体培养基，内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿。菌落呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明金黄色葡萄球菌（色素、表现）

6、：金黄色，铜绿假单胞菌（色素、表现）：青色，名解【抗酸染色】1.原理：抗酸染色是指细菌脱色后不被盐酸乙醇脱色的染色方法。分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使苯酚复红渗透使其着色。脂质的主要成分为分枝菌酸，表现出抗盐酸乙醇脱色的能力，故菌体被染成红色；非抗酸菌被苯酚复红着色后，被盐酸乙醇脱色，被亚甲蓝染成蓝色。2.步骤：1)初染：苯酚复红5min2)脱色：3%盐酸乙醇，30~60s3)复染：碱性甲基蓝1min4)吸水纸吸干油镜下观察3.结果：抗酸阳性菌被染成红色；非抗酸菌被染成蓝色4

7、.意义：鉴定细菌的抗酸性【革兰染色】1.原理（细胞壁学说为重点）（3分）：革兰阳性菌细胞壁结构致密，肽聚糖含量高且交联度大，脂质含量少。乙醇脱色溶解细胞壁脂质形成小孔，但脱水所用使细胞壁收缩构成屏障，通透性降低，阻止结晶紫-碘复合物溢出，细胞保留初染的紫色。革兰阴性菌细胞壁结构疏松，肽聚糖层较薄，外膜含有丰富脂质，乙醇脱色时溶解脂质，细胞壁通透性增高，胞内结晶紫-碘复合物溢出，细菌脱色经复染后成红色。2.步骤（4分）：1)涂片：一滴0.9%NaCl于载玻片，取菌苔涂成菌膜2)干燥3)固定4)结晶紫初染：一二滴1min，水洗

8、5)碘液煤染：一二滴1min，水洗6)95%乙醇脱色：一二滴0.5min，水洗7)复红复染：一二滴1min，水洗8)吸水纸吸干油镜下观察3.结果（2分）：革兰阳性菌（表皮葡萄球菌）染成紫色；革兰阴性菌（大肠埃希菌）染成红色4.意义（1分）：观察细菌的形态、大小、排列方式，根据染色结果将细菌分为革兰阳性菌