临床微生物学检验(sop).doc

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1、临床微生物学检验(sop)Ⅰ高压锅使用的标准操作程序（SOP）实验室名称项目编号制定日期检验科高压锅的使用检验科2006年06月06日【目的】确保高压效果的可靠性。【适用范围】蒸气式高压锅。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【操作方法】1．将水加到高压锅内至其刻度线，将欲灭菌物品放入锅内，关闭锅门，拧紧螺丝并确认已经封闭。2．打开排气阀。3．打开蒸汽开关，向锅内输入蒸汽或接通电源，使产生蒸汽。4．观察排气阀的排气情况，待

2、排出的气体由冷气变为蒸汽，压力表达到0.05mPa时，关闭排气阀。5．观察压力表，当压力升至0.15mPa时，开始计时。6．压力达0.15mPa后，可调节进气阀，减少进气量，维持压力并使其稳定在0.15mPa。电加热时，可切断电源，维持压力持续15分钟，至多不超过30分钟，否则营养物质破坏。7．关闭进气阀门或切断电源，让锅内物品自然冷却，不可马上打开排气阀，以免发生意外。8．待锅内压力降为零时，可打开锅盖，取出物品。操作人员部门主管质量负责人姓名唐玉贞检验科检验科日期06年06月06日Ⅱ培养箱使用的校准标

3、准操作程序（SOP）实验室名称项目编号制定日期检验科培养箱使用、维护与校准检验科06年06月06日【目的】确保培养箱温度恒定。【适用范围】各种类型隔水式、温度设定为27℃、35℃、42℃、56℃培养箱。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【操作方法】1．培养箱应放置于水平地面（或坚固的水平台），电源电压须匹配。2．从注水口先将隔水箱内的水注满到浮标要求的位置。3．将温度调节旋扭调至所需温度，然后将电源开关拨至“开”处。4．

4、每次使用时应在培养箱顶部插入标准温度计，监测实际温度。5．培养箱工作温度波动范围应控制在±10C以内。6．培养箱正面贴有温度记录表，记录每天上班和下班时温度，如温度超出正常范围，指示该温度的刻度应划上红圈，并把修正温度记录下来。7．培养箱内外应保持清洁。操作人员部门主管质量负责人姓名唐玉贞检验科检验科日期06年06月06日Ⅲ培养基制备的标准操作程序（SOP）实验室名称项目编号制定日期检验科培养基的制备检验科06年06月06日【目的】保证培养基的质量。【适用范围】使用成品培养基干粉制备各种分离培养基。【该S

5、OP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。【步骤】1.在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，然后放入一定量培养基干粉，补足水量，轻轻搅拌以促进溶解。2.校正pH：高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH。3.分装：液体培养基一般在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。4.质量检查[1]无菌试验：将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格

6、。[2]效果检验：按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。5.保存：液体培养基及琼脂平板须在40C保存，一般不超过7天，如用塑料袋密封至多保存2周。操作人员部门主管质量负责人姓名唐玉贞检验科检验科日期06年06月06日Ⅳ革兰染色的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期检验科革兰染色检验科06年06月06日【目的】确保染色结果清晰可靠。【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、

7、科主任。【试剂】1.结晶紫溶液A液：结晶紫2g95%乙醇20mlΒ液：草酸铵0.8g蒸馏水80ml使用前24小时将A液Β液混合后，过虑后装入试剂瓶内备用。2.碘液碘1g碘化钾2g蒸馏水300ml3.脱色液：95%乙醇4.复染液储存液：沙黄2.5g95%乙醇100ml应用液：储存液10ml蒸馏水90ml【方法】1.待检标本用无菌生理盐水涂片，经自然干燥或火焰固定。2.加结晶紫液染1分钟，清水冲去染液。3.加碘液染1分钟，清水冲去染液。4.加95%乙醇脱色液，不时摇动约10-30分钟，至紫色已脱落为至，水冲洗

8、。5.加复染液（伊红），染30分钟，水冲洗。6.待涂片自然干燥后，油镜镜检。操作人员部门主管质量负责人姓名唐玉贞检验科检验科日期06年06月06日Ⅴ抗酸染色的标准操作程序实验室名称项目编号制定日期检验科抗酸染色检验科06年06月06日【目的】确保染色结果清晰可靠。【方法】（一）碱性复红染色法【试剂】1、萋纳石炭酸复红溶液碱性复红乙醇饱和溶液10ml5%石炭酸溶液90ml2、脱色剂浓盐酸3ml95%乙醇97ml3、复染液（吕弗勒