间歇低氧对大鼠 INS-1细胞 JNK、PDX-1的影响.pdf

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1、·56·解放军医药杂志2014年7月第26卷第7期Med&Ph!』::!:!·论著·间歇低氧对大鼠INS一1细胞JNK、PDX一1的影响卢巍,于娜,林雪娇,王东亮,康健[摘要]目的体外培养大鼠INS一1细胞,观察间歇低氧条件直接作用于细胞引起的改变。方法常氧组细胞(CON)不进行间歇低氧暴露,IH组细胞暴露间歇低氧,收集暴露(1、2、3d)的培养上清及细胞,检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及JNK1mRNA、JNK1/2蛋白表达水平。给予SP600125阻断JNK蛋白活性,观察下游基因P

2、DX一1mRNA及蛋白变化。结果随着间歇低氧暴露时间的延长,IH组细胞培养上清中MDA含量呈增高趋势,SOD活力呈降低趋势。IH组细胞表达JNK1mRNA较相应时间CON组明显增高,其表达量进行性下降。磷酸化JNK1于IH3d组呈现出高表达。给予SP600125可引起PDX.1蛋白明显增高。结论间歇低氧可以直接引起INS一1细胞氧化损伤,随暴露时间的延长而加重,可能是通过诱导JNK1转录水平及蛋白活化而实现的。[关键词]细胞低氧;氧化性应激;胰岛素分泌细胞;大鼠[中国图书资料分类号]R一332[文献标志码]A[文

3、章编号]2095—140X(2014)07—0056-05『DoI110.3969/j.issn.2095.140X.2014.07.014EffectofIntermittentHypoxiaonJNKandPDX-1ofINS-1PancreaticBetaCellsinRatsLUWei,YUNa,LINXue—jiao,WANGDong—liang,KANGJian(1.DepartmentofRespiratoryDiseases,theFirstAfiliatedHospitalofChinaMedi

4、calUniversity,Shenyang110001,China;2.DepartmentofRespiratoryDiseases,202HospitalofPLA,Shenyang110003,China)[Abstract]ObjectiveToobservethedirectefectonINS一1cellsofratsculturedinvitrounderintermittenthy—poxia.MethodsCellsincommonoxygengroup(CONgroup)wasnotexpo

5、sedunderintermittenthypoxia,whileceilsinintermittenthypoxiagroup(IHgroup)wereexposedunderintermittenthypoxia.Cuhuredsupernateandcellswerecol—lectedat1d,2“dand3dafterexposureandthelevelsofsuperoxidedismutase(SOD),malondialdehyde(MDA)andexpressionsofJNK1mRNAand

6、JNK1/2inthetWOgroupsweredetected.SP600125wasusedtobolcktheactivityofJNK,andchangesofdownstreamgenePDX一1mRNAandproteinwerealsoobserved.ResultsTheMDAlevelatsuper—natewassignificantlyhigherandSODactivitywassignificantlydecreasedinculturedsupernateofIHgroupwithpr

7、olongedexposuretimeunderintermittenthypoxia.JNK1mRNAexpressionwassignificantlyupregulatedinIHgroupcomparedwiththatinCONgroupatthesametime,andexpressionvaluewasprogressivelydecreased.Thehighphospho—JNK1ex—pressionwasfound3dafterexposure.TheexpressionofPDX一1was

8、significantlyincreasedafterusingSP600125.Con—clusionIntermittenthypoxiamaydirectlyinduceoxidativedamageeffectonINS一1cells,andthedamagebecomesseri—OUSwithtimeprolonging,anditsdamagemaybedo

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