血管扩张刺激磷蛋白与微管蛋白的结合.pdf

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1、第50卷第11期山东大学学报(医学版)20l211川VO1．50NO．1lJOURNALOFSHANDONGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES)NOV．20l2文章编号：1671—7554(2012)1l一0018—05DOI：10．6040／j．issn．1671-7554．2012．11．004血管扩张刺激磷蛋白与微管蛋白的结合陶燕(江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江212013)摘要：目的探讨血管扩张刺激磷蛋白(VASP)及其丝氨酸157(p-VASP$157)和239(p-VASP$239)位点磷酸化与d一微管蛋白(—T

2、ubulin)之间的关系，明确VASP是一个新的微管相关蛋白。方法采用免疫荧光染色观察P—VASPS157、P—VASP$239和13~一Tubulin在人宫颈癌上皮细胞HeLa的共定位；利用免疫共沉淀、微管沉淀和Westernblot方法明确VASP及其不同位点磷酸化与—Tubulin的结合情况。结果VASP和p-VASPS157能够与o【一Tubulin结合；P—VASP$239在细胞周期各个时期与一Tubulin均无共定位关系。结论VASP是一个新的微管相关蛋白，其丝氨酸157磷酸化与二者的结合相关。关键词：血管扩张刺激磷蛋白；磷酸化血管扩张刺

3、激磷蛋白；0【-微管蛋白；微管相关蛋白；人宫颈癌上皮细胞中图分类号：R329．2+8文献标志码：AThecombinationbetweenvasodilator—stimulatedphosphoproteinandmicrotubuleproteinTAOYan(SchoolofMedicalScienceandLaboratoryMedicine，JiangsuUniversity，Zhenjiang212013，Jiangsu，China)Abstract：0bjectiveToinvestigatetherelationshipbetwee

4、nvasodilator—stimulatedphosphoprotein(VASP)，serine157／serine239phosphorylatedVASP(p-VASP$157／p—VASPS239)and0【一Tubulin，andtoconfirmVASPasanewmicrotubule—associatedprotein(MAP)．MetIIodsTheCO—localizationofP—VASP$157／p—VASP$239and仅一TubulininHelacellswereanalyzedbytheimmunofluoresc

5、encentassay．Co—immunoprecipitationassay，MicrotubulepelletingassayandWesternblotassaywereappliedtodetectthecombinationbetweenVASP／phosphor—VASPando【一Tubulin．ResultsVASPandp-VASPS157couldbindwith0l—Tubulin．p-VASP$239didnotCO—localizewith0I—Tubulinduringthewholecellcycle．Conclusio

6、nVASPisanewmicrotubule—associatedprotein，andtheserine157phosphorylationoftheproteinisinvolvedintheassociationbetweenVASPando【一Tubulin．Keywords：Vasodilator—stimulatedphosphoprotein；Phosphorylatedvasodilator—stimulatedphosphoprotein；o【一Tubulin；Microtubule—associatedprotein：Humanc

7、ervixcancercellline血管扩张刺激磷蛋白(vasodilator—stimulated位点(Thr278)，这3个位点在体内外直接受蛋白激phosphoprotein，VASP)是Enabled(Ena)／VASP蛋酶A(PKA)、蛋白激酶G(PKG)和蛋白激酶C白家族的重要成员之一。Ena／VASP家族是一组与(PKC)调控。J。资料表明，Ena／VASP家族在肌动肌动蛋白调节相关的多功能蛋白，在以肌动蛋白为蛋白细胞骨架重塑中起着重要作用。VASP能够直基础的细胞行为中发挥着重要的调节作用。VASP接与单体或者肌动蛋白丝结合，在盖帽

8、蛋白存在时，蛋白由380个氨基酸组成，含有3个磷酸化位点，两可在体外促进肌动蛋白丝成核、成束和延长。报道个为