黄连解毒汤对记忆获得性障碍小鼠学习记忆能力和中枢胆碱能系统的影响.pdf

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1、中药药理与临床2013；29(5)、彩、驴汐谚·自《名方研究§、》痧-—黄连解毒汤对记忆获得性障碍小鼠学习记忆能力和中枢胆碱能系统的影响李斌，谢淑玲，彭丽燕，王飞，杨昆，伍文彬。一(成都中医药大学，成都610075；成都中医药大学中医脏腑病证实验室，成都610075)摘要目的：观察黄连解毒汤(Huan0ianJieduDecoction，}王JD)对东莨菪碱致记忆获得性障碍模型小鼠学习记忆能力及中枢胆碱能系统的影响。方法：将60只小鼠按体重、性别随机分为6组，分别为空白对照组、东茛菪碱模型组、安理申阳性组(2．05ms／kg)、黄连解毒汤低(3g／kg)、中(6S／kg)

2、、高(12g／kg)剂量组。连续灌服受试药物7天后造模，正常对照组和东莨菪碱模型组每日灌服等剂量生理盐水，除正常对照组腹腔注射等剂量生理盐水外，其余5组小鼠腹腔注射东莨菪碱(3ml【g)建立记忆获得性障碍模型。30min后进行Morris水迷宫实验，测试结束后处死动物，摘全脑在低温环境下分离大脑皮层、海马组织，于匀浆管中充分研碎，制成10％脑组织匀浆，比色法检测AchE活性、chAT活性。结果：与模型组比较，黄连解毒汤各剂量组均可提高模型小鼠的学习记忆能力，缩短逃避潜伏期时间(P<0．05)，延长有效区停留时间及游泳路程(P<0．05)，并能降低模型小鼠脑内AchE活性，

3、提高ChAT活性(P<0．05)；与安理申阳性纽比较，黄连解毒汤各剂量组除ChAT活性，其他指标均无差异。结论：黄连解毒汤可改善东莨菪碱致记忆获得性障碍模型小鼠的学习记忆能力，其机制可能与增强ChAT活性、抑制AchE活性有关。关键词黄连解毒汤；学习记忆能力；东莨菪碱；胆碱能系统一黄连解毒汤原载于《外台秘要》(引崔氏方)，由黄连、黄柏、1．4仪器WMT-100Morris水迷宫视频分析系统，成都泰盟软黄芩、栀子组成，被视为清热解毒的代表方。近年来对其研究不件有限公司；VARIOSKANFLASH3001全波长读数仪，美国断有新的拓展，扩大其治疗疾病的应用范围，广泛用于心烦

4、不Thermo公司。安，夜间谵妄，言词颠倒或狂躁不宁，声高气粗，口气秽臭等内毒1．5方法将60只小鼠按体重、性别随机分为6组，每组1O蕴积、热伤脑络之证的治疗。研究发现-10黄连解毒汤及其组只，分别为空白对照组、东莨菪碱模型组、安理申阳性组、黄连解成生药均对AD有较好的作用。但基于胆碱能系统损伤修复作毒汤低(3g／kg)、中(6S／kg)、高(12g／kg)剂量组。连续灌服各用，通过拟痴呆动物模型研究黄连解毒汤治疗AD的实验报道受试药物7d后造模，正常对照组和东莨菪碱模型组每日灌服等尚不多，本实验选用东莨菪碱腹腔注射致记忆获得性障碍模剂量生理盐水。除正常对照组腹腔注射等剂

5、量生理盐水外，其型，研究黄连解毒汤对模型小鼠学习记忆能力的改善作用和对余5组小鼠腹腔注射东莨菪碱(3ms／ks)建立记忆获得性障碍胆碱能系统损伤的修复作用，旨在阐明其作用机制。模型】，给予东莨菪碱30min后进行Morris水迷宫实验。1．5．1Morris水迷宫实验实验连续5天，分为定位航行实1材料与方法验和空间探索实验，前3天为训练期，第4天为定位航行实验，第5天为空间探索实验。设置程序将水桶”十”字分成四个象1．t试验药物黄连解毒汤(黄连225g、黄柏150g、黄芩限，每个象限池壁边缘中点为人水点。平台置于第四象限中心，150g、栀子225g)均购自成都中医药大学附

6、属医院，由成都中医每日依次从第一、二、三象限人水点将动物面向池壁放入水中，药大学药学院马云桐教授鉴定为正品。原方加10、8、8倍量水，记录动物寻找并爬上平台所需时间，即逃避潜伏期。如未找到浸泡30rain，按照120℃温度提取时间依次为2、1．5、1．5h，分别平台，潜伏期记录为90s。第5天撤除站台，依次从第一、二、三将3次提取液粗滤，80℃浓缩为0．6S／ml放人冰箱备用。盐酸象限入水点将动物面向池壁放入水中，三次分别记录动物90s多奈哌齐片(商品名：安理申，10ms／片)，批号110807A，卫材内有效区(站台直径2倍范围)停留时间、有效区(站台直径2(中国)药业有

7、限公司。倍范围)游泳路程。1．2动物昆明种小鼠，清洁级，雌雄各半，体重20±2g，由成1．5．2脑组织生化指标行为学测试结束后处死动物，摘全都达硕生物科技有限公司提供，动物生产许可证号：SCXK(川)脑以冰冷生理盐水清洗血迹，在低温环境下分离大脑皮层、海马2008-24。饲养于成都中医药大学中医脏腑病证实验室动物房，组织，于匀浆管中充分研碎，制成10％脑组织匀浆，离心取上清动物使用许可证号：SYXK(川)2012-179。液，保存于-20℃冰箱中备用。取待测10％脑组织匀浆，按试剂1．3试剂氢溴酸东莨菪碱注射液(0．3ms／m