Bio-rad MicroPulser电穿孔仪(中文).doc

Bio-rad MicroPulser电穿孔仪(中文).doc

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1、MicroPulser操作方法1.选择预设的程序设置MicroPulser预设了数种常见的微生物的电击程序如下:MnemonicOrganismCuvette(cm)Voltage(KV)NumberofpulsesTimeconstant(msec)BacteriaEc1E.coil0.11.81Ec2E.coil0.22.51StAS.aureus0.21.812.5AgrA.tumefaclens0.12.21Ec3E.coil0.23.01FungiSc2S.cerevislae0.21.51Sc4S.cerevislae0.23.01ShSS.pombe0.22.01DicD.di

2、scoldeum0.41.021.0PicP.pastoris0.22.01按"Settings"键选择"Bacteria","Fungi",和"Manual"设置.当"Fungi"旁的LED灯亮时,预存的真菌转化程序即被调出,按"Raise"和"Lower"键显示出不同的真菌转化程序。电击的参数自动按显示的程序设定。同样的,选择"Bacteria"程序相同。2.使用Micropulser的手动模式A.改变电压按"Settings"键,当"Manual".旁的LED灯亮时,显示屏显示电压值(单位kV).按"Raise"和"Lower"键在0.20kVto3.00kV.之间改变电压设置。如果仪

3、器刚刚打开,显示值为"0.00"B.截短脉冲.当"Manual".旁的LED灯亮时,同时按"Raise"和"Lower"键LED屏显示“t—”,表示为脉冲选择了时间。开机时的默认设置为标准的指数衰减脉冲,衰减过程并不被截短,显示为“——”。同时按"Raise"和"Lower"键后只松开"Lower"键,显示数字为截短的脉冲持续时间,单位为毫秒,从1毫秒开始以0.1毫秒为增量一直到4毫秒。限定脉冲时间在1-4毫秒之间。同时按"Raise"和"Lower"键后只松开"Raise"键,可以调整脉冲时间到更短。3.脉冲功能按"Pulse"键到电容充电至设定电压;"PLS"显示在显示屏上。脉冲完成后会

4、发出一声响,如果是一次设置好的多重脉冲则在整个脉冲过程中每次脉冲后发出一声响,"PLS"一直在显示屏上显示。要想手动多重脉冲,则可以在一次脉冲完成发出一声响后,再次按"Pulse"键。如果实验中发出比较低程度的声响,伴随着"Arc"在显示器上显示,预防和淬火电弧系统启动,脉冲被中止。电击杯通常被击穿,如果样品电阻太小则电击杯仍可能被击穿。4.测量按"Measurements"键可以点亮"ActualkV"LED.显示最后一次脉冲试验的实际电压(单位kV),如果仪器刚刚开机并且没有使用过,显示器显示"0.00"。再次按"Measurements"键可以点亮"Timems"LED,显示上次脉冲持

5、续时间,如果仪器刚刚开机并且没有使用过,显示器显示"0.00"。

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