国产法医DNA检验试剂耗材检测DNA标准品的准确性研究.pdf

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1、重蕉生笙塑·技术交流·国产法医DNA检验试剂耗材检测DNA标准品的准确性研究孙敬，赵兴春，叶健，胡兰，李万水，李瑞云，季安全，刘冰，孙辉，庞晓东，张涛。(1．公安部物证鉴定中心，北京100038；2．公安部第一研究所，北京100048)摘要：目的利用法医DNA标准品对自主研发的法医DNA检验试剂耗材进行电泳检测准确性的实验考查。方法实验平台分为2个：平台1全部由美国AppliedBiosystems公司进口的3130xl遗传分析仪、16道电泳毛细管与甲酰胺、电泳缓冲液、凝胶构成；平台2由AppliedBiosystems公司进12的313

2、0xl遗传分析仪、16道电泳毛细管与本实验室研发的甲酰胺、电泳缓冲液、凝胶构成。在实验平台上对allelicladder、内标等标准品以及阳性对照9947a的STR复合扩增产物进行电泳检测，利用GeneMapper软件对电泳结果进行分析。结果自主研发的法医DNA检验试剂耗材可与国外进口的3130xl遗传分析仪配套使用，构建的实验平台对法医DNA标准品的检测结果准确无误。结论自主研发的甲酰胺、电泳缓冲液、凝胶等法医DNA检验试剂耗材检测准确性达到了国外同类产品水平。关键词：甲酰胺；电泳缓冲液；凝胶；准确性；法医DNA标准品中图分类号：DF7

3、95．2文献标识码：A文章编号：1008—3650(2013)02—0025—03TheaccuracystudyofreagentsforDNAelectrophoresisusingforensicDNAstandardsampleSUNJing，ZHAOXing-chun，YEJian，etal(InstituteofForensicScience，MinistryofPublicSecurity，BeOing100038。Cina)ABSTRACT：ObjectiveTostudytheaccuracyofreagentsforD

4、NAelectrophoresisusingforensicDNAstandardsam—ples．MethodsTwoexperimentplatformswereinvolvedinthedetectionsystems，onewasmadeupof3130xigeneticanalyzer，capillaryarrayandthereagentsforDNAelectrophoresisincludingformamide，bufferandpolymerfromAppliedBiosystemsInc．theotherwasmad

5、eupof3130xigeneticanalyzer，capillaryarrayfromAppliedBiosystemsInc．andthereagentsdevelopedbyourown．ForensicDNAstandardsamplessuchasallelicladder，internalstandardDNAandthePCRproductsofpositivecontrol9947aweredetectedOntheexperimentplatforms．TheresultswereanalyzedbyGeneMappe

6、rsoftware．ResultsTheformamide，bufferandpolymerdevelopedbyourowncanbecompatiblewith3130xlgeneticanalyzer．ThedetectionresultsofforensicDNAstandardsampleswereaccurate．ConclusionThereagentsforDNAelectrophoresisdevelopedbyourownareofthesameaccuracylevelasthesimilarforeignprodu

7、cts．KEYWORDS：formamide；buffer；polymer；accuracy；forensicDNAstandardsamples在日常法医DNA检验分析中，检测平台一般由DNA的迁移率和分辨率，DNA片段在凝胶中可按分测序仪和配套耗材两大部分组成。测序仪主要为各子大小逐一分离_3]。缓冲液在电泳过程中的主要作种型号的遗传分析仪，而法医DNA检验耗材主要包用是维持合适的pH值，电泳时正极与负极都会发生括电泳毛细管以及甲酰胺、电泳缓冲液、凝胶等试剂电解反应，正极发生的是氧化反应，负极发生的是还消耗品。其中甲酰胺的主要作用是作

8、为变性剂抑制原反应，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱，缓冲DNA分子二级结构的形成[1]。凝胶则作为DNA的液具有较强的缓冲能力，使溶液两极的pH值基本保支持物和分离介质，起到类似分子筛的作