扁担杆乙酸乙酯部位镇痛作用及作用机制研究-论文.pdf

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1、第37卷第3期辽宁师范大学学报(自然科学版)Vo1．37No．32Ol4年9月JournalofLiaoningNormalUniversity(NaturalScienceEdition)Sep．20l4文章编号：1000—1735(2014)03—0402—04doi：10．11679／lsxblk2014030402扁担杆乙酸乙酯部位镇痛作用及作用机制研究杨春光，高松，赵阳，李志祥(大连大学医学院，辽宁大连116622)摘要：观察扁担杆乙酸乙酯部位的镇痛作用并探讨其镇痛机制．采用化学分离法制备扁担杆乙酸乙酯部位．采用小鼠热刺激疼痛模型

2、和甲醛致痛模型观察其镇痛作用，采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清PEG和MDA的含量以及SOD活性．与对照组比较，低质量分数扁担杆乙酸乙酯部位能明显提高小鼠痛域，低质量分数和中质量分数乙酸乙酯部位可降低甲醛致痛第2时相反应评分值，并能降低血清PEG和MDA的含量，增强SOD活性．扁担杆乙酸乙酯部位具有一定镇痛作用，镇痛机制可能与降低血清PEG。和MDA的含量，促进NO合成有关．关键词：扁担杆；乙酸乙酯；镇痛中图分类号：R285．5文献标志码：A扁担杆(GrewiabilobaG．Don)为椴树科扁担杆属植物，别名娃娃拳．该属共有约150种，分布

3、于东半球热带地区，我国有30种，广布于西南、西北、东部至东北，但主产地为西南部[】]．在原产地常自生于平原或丘陵，低山山坡或山沟边灌丛中及疏林下，性强健，耐寒，耐干旱，耐瘠薄．扁担杆以干燥的根、枝、叶或全株入药，味辛、甘、苦，性温，归肝、脾、胃经[2]．《新旧本草》记载扁担杆变种小花扁担杆枝叶煮汁可治小儿蛔虫病；《开宝本草》称其可“主三虫，下气消谷”[3；《中药大辞典》记载其全株和枝叶能祛风除湿、理气消痞，可治A,JL因虫疳积、大人气痞、脾虚食少、妇女崩带、风湿c4]．扁担杆的根皮在部分国家或地区民间用来治疗皮肤脓疱疮等细菌感染[5_．现代

4、药理实验表明，扁担杆提取物具有抗菌、抗疟疾、抗炎等作用，但对扁担杆提取物镇痛作用及机制的研究不多]．本研究采用物理致痛及化学致痛动物模型，探讨扁担杆乙酸乙酯部位(ethylacetatefractionfromGrewiabiloba，EFG)的镇痛作用及可能的作用机制．1材料与方法1．1试剂与仪器扁担杆药材全株采自大连大黑山山区(由大连大学医学院中药教研室高松鉴定)；石油醚(国药集团化学试剂有限公司，批号：F20120720)、乙酸乙酯(沈阳市新光化工厂，批号：201200310)；盐酸吗啡注射液(东北制药集团沈阳第一制药厂，批号：110

5、604)；甲醛溶液(沈阳天罡化学试剂厂，分析纯)；PEG试剂盒、SOD试剂盒、MDA试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供；YLS一6B智能热板仪(淮北正华生物仪器设备有限公司)；LABOROTA一4000型旋转蒸发仪(德国Heidolph)；SHZ一95型循环水收稿日期：2014—04—15基金项目：大连大学大学生创新创业训练计划项目(2013115)作者简介：杨春光(1971一)，男，湖北黄陂人，大连大学讲师，博士第3期杨春光等：扁担杆乙酸乙酯部位镇痛作用及作用机制研究403式多用真空泵(河南省巩义市英峪予华仪器厂)；HH数显恒温水浴锅(

6、江苏金坛市宏华仪器厂)；其余试剂均为分析纯．1．2药材的提取与分离取扁担杆药材干燥枝1kg，室温下用体积分数为75乙醇浸泡24h后，用体积分数为85乙醇分批次回流提取3次，浓缩成浸膏，得乙醇初提物．加适量水溶解后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，至有机相无色，所得提取液抽滤，旋转蒸发仪浓缩，最后干燥得浸膏粉，密封，置4℃冰箱备用．用前以体积分数为1％吐温一80溶液溶解，用蒸馏水配制成高质量分数(25)、中质量分数(12．5％)和低质量分数(5o,4)药液．1．3扁担杆乙酸乙酯部位(EFG)对小鼠热刺激性疼痛的影响选体重在(2O±2)g昆明

7、种雌性小鼠，实验前将小鼠放置于(55±O．5)℃的热板仪上，以小鼠舔后足的时间作为痛阈值，每只测2次，均值为实验前正常痛阈值．剔除3OS不舔后足者及跳跃者，共筛选得到6O只合格小鼠．将合格小鼠随机分5组，每组1O只，分别为对照(生理盐水)组、吗啡组、EFG低质量分数组、EFG中质量分数组和EFG高质量分数组．对照组和EFG给药组分别灌胃给予生理盐水和不同质量分数扁担杆乙酸乙酯部位，给药体积为0．2mL／10g，每天1次，连续给药3d．吗啡组实验前腹腔注射0．15mL／10g．末次给药后，分别在3O，6O，90min用热板测痛仪检测小鼠舔后足

8、时间，超过60s不舔后足者按照60s记．比较给药前后各组小鼠舔后足时间．实验结束后，快速摘小鼠眼球取血，加入柠檬酸钠混合后，3500r／rain离心15min，仔细收集上清．将血