微小RNA-181b及其靶基因肝癌缺失基因-1在肝癌发生中的作用-论文.pdf

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1、-2070·中华实验外科杂志2013年l0月第30卷第1O期ChinJExpSurg，October2013，Vo1．30No．10．·肝脏外科·微小RNA一181b及其靶基因肝癌缺失基因一1在肝癌发生中的作用李颖卢忠心孔晓宇魏礼清【摘要1目的探讨微小RNA(miRNA，miR)一181h对肝癌缺失基因一1(DLC—1)的调控及其在肝癌发病中的作用。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)和Westernblot检测4份正常肝脏组织，17份癌旁组织、肝癌组织及肝癌5MMC7721细胞、胚肝LO2

2、细胞中miR-181b和DLC—l的mRNA和蛋白质表达水平。应用miR一181b抑制剂下调肝癌细胞SMMC7721中miR一181b表达后，实时定量聚合酶链反应和Westemblot检测SMMC7721细胞中DLC—I表达水平的变化。结果miR．181b在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0．162-4-0．004、0．175±0．021和0．656±0．034，肝癌组织高于正常肝组织(P<0．05)。miR一181b在SMMC7721细胞中的表达较LO2细胞上调(0．723±0．04

3、2和0．262±0．037，P<0．01)。DLC一1mRNA在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0．392±0．094、0．187±0．043和0．0814-0．012，肝癌组织低于正常肝组织(P<0．05)；DLC一1蛋白在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0．423±0．026、0．214±0．029和0．112±0．021，差异有统计学意义(P<0．01)。miR一181b抑制剂转染SMMC7721细胞后，DLC一1蛋白在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别

4、为0．1324-0．027、0．379±0．019和0．125±0．015，转染组较其他两组明显升高(P<0．05)。结论miR一181b在肝癌组织中表达上调，其抑制DLC一1的表达可能是肝癌发生的重要机制。【关键词】癌，肝细胞；微小RNA一181b；肝癌缺失基因一1RoleofmicroRNA181-banditstargetgeneoncogenedeletedinlivercancer-1inhepatocellularcar-cinomapathogenesisLIl，，LuZhong—xin，

5、KONGXiao—yn，眦，Li—qing．CentralHospitalofWuhan，TongfiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430014，ChinaCorrespondingauthor：聊Li—qing，Email：zhezhu2DoD@163．con【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheregulatoryeffectofmicroRNA一181b(miR一181b)o

6、nde—letedinlivercancer一1(DLC一1)anditsroleinhepatocarcinogenesis．MethodsmiR一181bandDLC一1mRNAexpressionlevelsinnormaltissue，paraneoplastictissue，livercancertissueandlivercancercellsweredetectedbyusingreal—timefluorescentquantitativepolymerasechainreaction(

7、FQ．PCR)．DLC一1proteinexpressionwasdetectedbyusingWesternblotting．miR．181binhibitorwastransfectedintosMMC7721cellsandtheexpressionchangesofDLC—lmRNAandproteinwereexaminedbyusingFQ—PCRandWesternblottingrespectively．ResultsmiR一181bwasup—regulatedinhepatocell

8、ularcarcinomaandadiacenttissuesascomparedtonormallivertissuesandtheexpressionofmiR．181bwasalsoincreasedinSMMC7721cellsascomparedtofetallivercellsL02．whereastheexpressionlevelsofDLC一1mRNAandproteinweredecreasedinparaneoplas