乙型肝炎表面抗原对单核细胞来源的树突状细胞Toll样受体4信号通路的影响-论文.pdf

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1、·94·中华传染病杂志2O14年2月第32卷第2期ChinJInfectDis，February2014，Vo1．32，No．2基础论著乙型肝炎表面抗原对单核细胞来源的树突状细胞Toll样受体4信号通路的影响燕飞汤永志潘柯传朱坚胜朱敏陈华忠赵海红刘均艳陈景丹【摘要】目的探讨HBsAg对脂多糖刺激成熟的单核细胞来源的树突状细胞(MoDC)功能和细胞表面TLR4信号通路的影响。方法将健康者PBMC诱导分化为未成熟MoDC，加入不同浓度HBsAg体外刺激，再经脂多糖刺激获得成熟MoDC。Western印迹检测各组TLR4、核因子一

2、B、丝裂原激活蛋白激酶信号通路蛋白表达，ELISA检测细胞因子，细胞增殖与毒性检测试剂盒检测刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果未经HBsAg刺激的对照组TLR4、核因子一、pp38、磷酸化c—Jun氨基末端激酶1／2(pJNK1／2)蛋白分别为0．43±0，14、0．69士0．27、0．21±0．09和0．44±0．13，5~tg／mLHBsAg刺激后分别增至1．22±0．39、1．37-4-0．40、0．74±0．17和0．92-4-0．15(t值分别为一3．14、一3

3、．09、一5．07和一2．93，均P<0．05)；但细胞外信号调节激酶1／2表达下降(2．43±o．80比1．13±o．23，一3．18，P％0．05)。5／~g／mLHBsAg刺激后的MoDC刺激同种异体T淋巴细胞，其刺激指数高于对照组，且随MoDC／淋巴细胞比值增高而增高(t值分别为一5．72、一4．93和一4．96，均P％0．05)。5~g／mLHBsAg刺激后MoDC分泌IL一12、TNF—a分别为(637．8±19．2)和(710．6-4-47．4)pg／mL，对照组分别为(597．8±15．4)和(568．5土3

4、5．O)pg／m[(t值分别为一5．07和～6．7O，均P<0．05)。结论HBsAg可激活MoDC表面TLR4信号通路，促进细胞因子分泌，增强刺激T淋巴细胞增殖的能力。【关键词】树突状细胞；肝炎表面抗原，乙型；Toll样受体4；核因子一B；丝裂原激活蛋白激酶类；信号传导EffectsofhepatitisBsurfaceantigenontolllikereceptor4signalingpathwayofmonocyte-deriveddendriticcellsYahFei，TangYongzhi，PanKechuan

5、，ZhuJiansheng，ZhuMin，ChenHuazhong，ZhaoHaihong，LiuJunyan，ChenJingdan．DepartmentofInfectiousDiseases，TaizhouHospitalAffiliatedWenzhouMedicalUniversity，Linhai317000，ChinaC0rres0扎d咒gauthor：ZhuJiansheng，Email：zhujs@enzemed，coT~n[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffects

6、ofhepatitisBsurfaceantigen(HBsAg)onthetoll—likereceptor4(TLR4)signalingpathwayoflipopo1ysaccharide(LPS)一stimuiatedhumanmonocyte—deriveddendriticcells(MoDC)．MethodsTheperiphera1bloodmononuclearcells(PBMC)wereisolatedfromhealthyvolunteers，andtheninducedandproliferate

7、dtoimmatureMoIX；invitro．MatureMoDCwereobtainedbvHBsAgandLPSstimulation．TheexpressionsofTLR4，nuclearfactorKB(NF—KB)andmitogen-activatedproteinkinase(MAPK)proteinweredeterminedbyWesternblottingassay，andtheconcentrationsofcytokinesinthesupermatantweredetectedbyenzyme-

8、linkedimmunosorhentassay(ELISA)．Inaddition，thecapacityofMoDCtostimulateallogeniclymphocytewasmeasuredbyMTSassay．Statisticalanalyseswerep~rformedb