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时间:2020-04-19
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1、实验四果蝇的单因子实验指导老师:王桔红陈晓芸一.实验目的1.理解分离规律的原理,掌握果蝇的杂交技术。2.记录交配结果和掌握统计处理方法二.实验原理果蝇的单因子遗传是指常染色体上一对等位基因的传递规律。由于显隐关系为完全显性,在子一代只表现显性性状,但基因型是杂合状态。在形成配子时,基因保持相对独立,又按原样分配到不同的配子中去,理论上的比例是1:1。雌雄配子各1:1,结合的概率又相等,子二代的基因型就有三种,比例是1:2:1,而表型就是3:1。3三.实验材料、器具及试剂1.实验材料:野生型果蝇(+/+)、残翅果蝇(Vg/Vg)vg的座位是第二染色体
2、67.0。2.器具:麻醉瓶、白瓷板,海绵,放大镜,毛笔,镊子,培养瓶。3.药品:乙醚,玉米粉,琼脂,蔗糖.酵母粉,苯甲酸。4四.实验方法步骤1、果蝇饲养:把果蝇亲本转入新培养瓶,扩大培养。2、选择处女蝇:实验前2-3天陆续按组合收集8小时内羽化的果蝇,分离♀♂。5处女蝇的选取方法8-12小时内羽化的果蝇分离♀♂①选择含有较多即将羽化、颜色变黑的蛹的培养瓶。②第一天晚上10:00清除瓶内成蝇③第二天上午6:00,下午2:00,晚上10:00分别收集分离♀♂成蝇,如数量不够,次日继续收集,处女蝇应单独存放在一个新的培养瓶中。④每瓶培养基放置5-6对亲本
3、果蝇,必须保证雌蝇数量为5-6只。63、果蝇杂交:转移5-6对亲本,记录杂交日期和亲本组合名称,并注明班级学号。4、去亲本:杂交后7-8天5、F1代性状观察及自交:去亲本后4-5天进行,连续检查2-3天;移5-6对进行自交(无需处女蝇)。6、再去亲本:自交后7-8天。7、记录结果:去亲本后4-5天进行,连续统计7-8天。7♀长翅×残翅♂++vgvg+vg+vg去亲本7~8天♀♂基因型配子F1基因型8♀长翅×长翅♂+vg+vg去亲本7~8天F1代自交F2代F2代基因型分离比为1:2:1,表现型分离比为3:1。9将实验结果的数据填写到表格单因子杂交实验
4、结果正反交的结果是否有差异:1011k表示子代表型数。自由度df=k-1=X2=∑(O-C)2C(查表得出P值,若P>0.05,说明“差异不显著”,实验值与理论值相符合,即实验符合二对因子自由组合的假说。若P<0.05,说明“差异显著”,实际值与理论值不符合,即实验数据不能用二对因子的自由组合来解释。若P<0.01说明“差异极显著”。)结论:P,观察值与期望值之间的差异(不显著/显著/极显著),实验结果(符合/不符合)3:1的分离比。12Pdf…0.300.200.100.050.011…1.0741.6422.7063.8416.6352…2.4
5、083.2194.6055.9919.210X2表13
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